Kesan Jangkitan Virus Influenza A terhadap Pertumbuhan dan Metabolisme Sel MDCK Suspensi Menggunakan Model Dinamik

Wed May 18 16:34:23 CST 2022

Bahan dan Kaedah

3.1. Shake Flask Cultivations

Pra-kultur sel penggantungan MDCK.SUS2 telah ditanam dalam shaker flasks (125 mL polikarbonat Erlenmeyer flask, #431143, Corning®, bandar New York, NY, USA) dengan 50 mL isipadu kerja (wv) , dalam inkubator Multitron Pro (Infors HT, Bottmingen, Switzerland) pada 37 °C dan atmosfera CO2 5% dengan frekuensi gegaran 180 rpm. Sel telah dilalui setiap 3-4 hari dengan ketumpatan pembenihan 0.5-0.8 × 106 sel/mL.

IAV A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) virus benih digunakan untuk jangkitan, dihasilkan dalam sel MDCK yang melekat (ECACC # 84121903). Virus benih mempunyai titer 1.1 × 109 TCID50/mL.

Sel telah ditanam dalam medium yang ditakrifkan secara kimia, bebas protein dan bebas komponen haiwan, Smif8 (Smif8 PGD 2×, ditambah dengan glutamin 5 mM, dan 8 mM piruvat), dibangunkan khusus untuk penanaman sel MDCK ampaian [95].

Pertumbuhan dan eksperimen jangkitan untuk pengesahan model dilakukan menggunakan kelalang goncang 500 mL (#4113-0500, Nalgene™, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) dengan isipadu penanaman awal 200 mL pada 150 rpm. Dua penanaman telah dilakukan, satu mock-infection (Penanaman 1), di mana sel berkembang selama kira-kira 200 jam, dan satu jangkitan (Penanaman 2), di mana sel telah dijangkiti IAV pada kira-kira 49 jam selepas inokulasi. Untuk mencapai jangkitan segerak populasi sel, moi = 10 digunakan. Oleh kerana kepekatan sel yang agak rendah pada masa jangkitan (2.1 × 106 sel/mL) dan moi yang tinggi digunakan, penggantian sederhana mahupun penambahan trypsin (untuk pengaktifan virus) tidak diperlukan. Dalam kedua-dua penanaman, air Milli-Q steril telah ditambah sebelum pensampelan untuk mengimbangi penyejatan air (1–2 mL/hari) sejak eksperimen dilakukan dalam inkubator tidak terhidrat.

Sumber daripada: https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.