Subkultur merujuk kepada proses membahagikan budaya kepada bahagian kecil, menyuntik semula mereka ke dalam bekas kultur lain (botol), dan kemudian mengkultur. Kelalang kultur sel adalah bahan habis pakai yang biasa digunakan semasa menanam sel. Jadi, bagaimana untuk mensubkultur sel dalam kelalang?
Secara amnya, sel-sel dalam kelalang kultur sel membesar menjadi satu lapisan padat dan pada asasnya tepu. Untuk membolehkan sel terus membiak dan mengembangkan bilangan sel, adalah perlu untuk menjalankan operasi laluan. Sel terampai boleh diasingkan secara terus, manakala sel yang melekat perlu dihadam sebelum boleh diasingkan. Secara amnya, enzim proteolitik (seperti trypsin) digunakan untuk mencerna sel yang melekat ke dalam sel tunggal. Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) juga boleh ditambah untuk meningkatkan penghadaman. Perhatikan sel sehingga sel menjadi bulat dan terlepas dari dinding botol. Proses ini selalunya mengambil masa 5-15 minit. Untuk mengelakkan gumpalan sel, jangan ketik kelalang kultur sel semasa proses mencerna sel.
Untuk sel yang sukar dihadam terutamanya, anda boleh menambah larutan pencernaan EDTA trypsin dan meletakkan sel pada suhu 37°C hingga memudahkan penghadaman. Selepas sel dipisahkan dari dinding botol, segera tambahkan medium lengkap yang mengandungi serum untuk menghentikan penghadaman. Protein tertentu dalam serum boleh menghalang pankreas. Aktiviti enzim. Secara umum, sentrifugasi tidak diperlukan. Jika sel memerlukan medium bebas serum atau rendah serum, sentrifuge pada 125000g selama 5 minit, kemudian buang medium yang dihentikan, tambah medium baru yang sesuai dan campurkan perlahan-lahan sel sebelum subkultur.
Nisbah laluan sel secara amnya ialah 1:2 -1:20, bergantung pada jenis sel. Dalam proses laluan, tripsin akan merosakkan membran sel sesetengah sel. Anda boleh menggunakan pengikis sel untuk mengikis sel secara perlahan, menambah jumlah medium yang sesuai, pipet perlahan-lahan untuk mencampurkan sel dan memindahkannya ke kelalang kultur baharu.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.