Bagaimana untuk mengawal masa pencernaan trypsin dalam kelalang kultur sel

Wed May 18 16:33:14 CST 2022

Kultur sel melibatkan inokulasi sel, penanaman, penuaian dan proses lain. Sel-sel dalam kelalang kultur sel telah berkembang ke tahap tertentu dan sel-sel perlu dituai. Pada masa ini, sel-sel pada dinding kelalang perlu dicerna dengan tripsin dan kemudian dituai. Masa penghadaman mesti dikawal semasa penggunaan pancreatin.

Trypsin ialah protease heterogen, yang boleh merendahkan protein pada membran sel dan kelalang kultur sel. Dengan merendahkan protein di lokasi tertentu, protein di persimpangan antara protein terdegradasi, dan sel menjadi sfera disebabkan oleh ketegangan sitoskeleton dalaman mereka, dengan itu memisahkan sel. Tahap penghadaman trypsin adalah langkah utama dalam kultur sel: serpihan sel yang dicerna secara berlebihan meningkat, buih hitam meningkat, sel akan gugur berkeping-keping, yang menjejaskan daya maju sel secara serius, dan beberapa sel terapung dan hilang dengan tripsin yang dibuang; pencernaan Tidak mencukupi, sel sukar dihembus dari dinding botol, pemipetan berulang juga akan merosakkan daya maju sel.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Tisu atau sel yang berbeza bertindak balas secara berbeza terhadap tindakan pancreatin. Aktiviti sel tersebar pancreatin juga berkaitan dengan kepekatan, suhu dan masa tindakannya. Apabila pH ialah 8.0 dan suhu ialah 37, keupayaan tindakan larutan pancreatin adalah agak kuat. Apabila menggunakan pancreatin, kepekatan, suhu dan masa harus dikawal untuk mengelakkan kerosakan sel yang disebabkan oleh penghadaman berlebihan. Oleh kerana Ca2+, Mg2+, serum dan protein boleh mengurangkan aktiviti pancreatin, BSS tanpa Ca2+ dan Mg2+ harus digunakan semasa menyediakan larutan pancreatin, seperti larutan D-Hanks. Apabila menamatkan penghadaman, gunakan medium kultur yang mengandungi serum atau perencat trypsin untuk menghentikan kesan pancreatin pada sel.

Selain itu, jika ia adalah sel yang baru dibeli, anda boleh menggunakan kepekatan trypsin yang rendah terlebih dahulu untuk mengetahui penghadaman. masa, dan perhatikan sama ada sel itu bulat setiap minit dan buat rekod. Ringkasnya, semasa menuai sel dalam kelalang kultur sel, masa pencernaan trypsin mesti dikawal untuk mengekalkan daya maju sel.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.