English
Bakteria lisogenik merujuk kepada bakteria yang mempunyai profaj yang terintegrasi pada kromosomnya dan boleh membesar dan membiak secara normal tanpa dilisekan. Bakteriofaj ringan telah digunakan secara meluas dalam bidang transduksi, vektor kejuruteraan genetik, dan biologi molekul. kelalang kultur sel boleh digunakan untuk memeriksa lisogenisitas bakteria. Kaedah operasi khusus adalah seperti berikut:
1. Kultur bakteria lisogenik: Inokulasi E. coli 225 (λ) diaktifkan oleh cerun LB ke dalam kelalang kultur sel 250ml yang mengandungi larutan kultur LB 20ml, kultur dengan goncangan pada 30°C selama 16 jam, dan kemudian ambil 2ml ampaian bakteria daripadanya dan sambungkannya ke satu lagi Dalam kelalang Erlenmeyer 250ml yang mengandungi 20ml sup LB, kultur dengan goncangan pada 37°C selama 2j kepada fasa logaritma.
2. Kecualikan faj bebas: Jika terikan yang akan diuji ialah Bacillus, ia boleh dijadikan suspensi spora, dan kemudian dirawat pada suhu 80°C selama 10 minit untuk membunuh fag yang mungkin terserap dan bebas pada permukaan bakteria lisogenik; jika terikan yang akan diuji adalah bukan Bacillus , Gunakan antiserum yang disediakan oleh fag atau larutan natrium sitrat 0.2% untuk mencuci sel-sel lisogen fasa log untuk mengeluarkan fag bebas yang terserap permukaan dan bebas. Selepas sentrifugasi pada 4000r/min selama 10 minit, supernatan boleh ditambah dengan bakteria penunjuk sensitif untuk penentuan plat dua lapisan, yang digunakan untuk menguji faj bebas sampel dan faj yang menyerap bakteria lisogenik. Faj selepas sentrifugasi Sel-sel teraruh.
3. Induksi bakteria lisogenik: bakteria yang dikumpul selepas sentrifugasi dibasuh dua kali dengan garam biasa steril, dan dijadikan kepekatan akhir 1011 sel/ml dengan garam biasa atau penimbal Tris-HCL 100mmol/l (pH7.0) Untuk penggantungan bakteria, tambah 5ml ampaian bakteria pada setiap hidangan, sinaran dengan lampu UV 30W pada jarak 30cm selama 30s, masukkan segera 5ml larutan kultur LB berkepekatan dua kali ganda, gaul rata dan eramkan dalam gelap pada suhu 37°C selama 2j.
4. Pemeriksaan strain lisogenik: Kendalikan mengikut kaedah agar dua lapisan, tambahkan beberapa titis kloroform pada lisat teraruh di atas, dan cairkan dengan sewajarnya dengan kaedah pencairan 10 kali ganda. Selepas memilih tiga pencairan pencairan, ambil 0.3ml untuk setiap pencairan. Gaul rata dengan 0.2ml suspensi bakteria E. coli 226 sensitif fasa logaritma, kemudian masukkan medium separuh badan LB yang telah dicairkan dan disejukkan hingga 45°C, gaul serta-merta, dan kemudian tuangkan ke atas plat medium pepejal LB. Selepas pemejalan, 37 Inkubasi pada ℃ selama 6j dan perhatikan. Jika sejumlah besar plak muncul pada plat kultur, ia membuktikan bahawa terikan yang diuji adalah lisogen.
Untuk memeriksa sama ada bakteria mempunyai lisogenisiti, ikut langkah di atas. Beri perhatian kepada kemandulan proses semasa operasi untuk mengelakkan operasi yang tidak betul yang menjejaskan keputusan ujian.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.