English
Lisis sel ialah kaedah eksperimen yang penting untuk menukar kebolehtelapan dan aktiviti sel. Ini bermakna selepas sel dijangkiti virus, virus menggunakan nutrien dalam sel perumah untuk mensintesis anak sendiri, dan kemudian keturunan virus memusnahkan sel perumah dan dilepaskan Keluar daripada sel. Dalam eksperimen lisis sel, kelalang kultur sel ialah bahan habis pakai biasa. Langkah-langkah untuk lisis sel adalah seperti berikut:
1. Tuangkan medium kultur, dan pasangkan botol kultur sel terbalik pada kertas penyerap supaya kertas penyerap akan menyerap medium kultur (atau letakkan botol tegak seketika untuk membolehkan sisa medium kultur mengalir ke bahagian bawah botol dan kemudian gunakan pipet untuk menyedutnya ).
2. Tambah 3ml PBS 4℃ yang telah disejukkan sebelumnya (0.01M pH7.2～7.3) pada setiap botol sel. Letakkan sel rata dan goncang perlahan-lahan selama 1 minit untuk mencuci sel, dan kemudian buang larutan pencuci. Ulangi operasi di atas dua kali, basuh sel tiga kali untuk membasuh cecair kultur. Buang PBS dan letakkan kelalang kultur di atas ais.
3. Tambah 10ul PMSF (100mM) kepada penimbal lisis 1ml, goncang dengan baik dan letakkan di atas ais. (PMSF mesti digoncang sehingga tiada kristal sebelum dicampur dengan larutan lisis.)
4. Tambah 400ul penimbal lisis yang mengandungi PMSF ke dalam setiap kelalang sel, dan lisis pada ais selama 30 minit. Untuk melisiskan sel sepenuhnya, kelalang mesti digoncang dengan kerap.
5. Selepas lisis, gunakan pengikis bersih untuk mengikis sel pada satu sisi kelalang kultur (tindakan harus pantas), dan kemudian gunakan pistol untuk mengalihkan serpihan sel dan lisis ke tiub empar 1.5ml. (Keseluruhan operasi hendaklah dilakukan di atas ais sebanyak mungkin.)
6. Empar pada 12000 rpm pada 4°C selama 5 minit. (Hidupkan emparan terlebih dahulu kepada pra-sejuk)
7. Pindahkan supernatan emparan ke dalam tiub emparan selama 0.5 minit dan simpan pada -20°C.
Kelalang kultur sel bukan sahaja digunakan untuk eksperimen lisis sel, tetapi juga untuk kultur sel dan tisu berskala sederhana di makmal, seperti sel Vero , sel HEK 293, sel CAR-T, sel CHO, sel serangga, dsb.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.