Материал ба аргууд
3.1. Shake Flask Cultivations
MDCK.SUS2 суспензийн эсүүдийн өмнөх өсгөвөрийг shaker flasks (125 мл поликарбонат эрлэнгүй колбонд, №431143, Corning®, Нью-Йорк хот, NY, АНУ) 50 мл ажлын эзэлхүүнтэй (wv) ургуулсан. , Multitron Pro инкубаторт (Infors HT, Bottmingen, Швейцарь) 37 °C температурт, 5% CO2 агаар мандалд 180 эрг / мин сэгсрэх давтамжтай. 0.5-0.8 × 106 эс/мл үрийн нягттай эсүүдийг 3-4 хоног тутамд дамжуулсан.
IAV A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) үрийн вирусыг халдварын үед ашиглаж, үүсгэсэн. наалдсан MDCK эсүүдэд (ECACC # 84121903). Үрийн вирүс нь 1.1 × 109 TCID50/мл титртэй.
Эсийг химийн хувьд тодорхойлогдсон, уураггүй, амьтны бүрэлдэхүүн хэсэггүй Smif8 (Smif8 PGD 2×, 5 мМ глютамин, 8) орчинд тариалсан. mM пируват), суспензийн MDCK эсийг [95] тариалахад тусгайлан боловсруулсан.
Загвар баталгаажуулах өсөлт ба халдварын туршилтыг 500 мл сэгсрэх колбонд (#4113-0500, Nalgene™, Thermo Scientific, Waltham, MA, АНУ) 150 эрг/мин-д 200 мл тариалалтын эхний эзэлхүүнтэй. Хоёр тариалалт хийсэн ба нэг нь хуурамч халдвар (1-р тариалалт), эсүүд 200 орчим цагийн турш ургасан, нэг халдвар (2-р тариалалт), тарилга хийснээс хойш 49 цагийн дараа эсүүд IAV-аар халдварлагдсан. Эсийн популяцид синхрон халдвар авахын тулд moi = 10-ийг ашигласан. Халдварын үед эсийн харьцангуй бага концентрацитай (2.1 × 106 эс/мл) ба их хэмжээний мои хэрэглэсэн тул дунд зэргийн орлуулах болон трипсин нэмэх (вирусыг идэвхжүүлэх) шаардлагагүй байв. Туршилтыг усгүй инкубаторт хийсэн тул усны ууршилтыг (1–2 мл/өдөр) нөхөхийн тулд дээж авахын өмнө ариутгасан Milli-Q ус нэмсэн.
Эх сурвалж: https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.