Īpaši soļi kāmja nieru šūnu audzēšanai šūnu kultūras kolbās

Wed May 18 11:47:36 CST 2022

Kultivējot dažādas šūnas, šūnu kultivēšanas kolbas ir sava veida šūnu kultūras palīgmateriāli, kas tiek izmantoti biežāk. Tos galvenokārt izmanto pielipušo šūnu kultūrai, un specifikācijas svārstās no 25 ml līdz 225 ml. Kāmja nieru šūnu kultivēšanas barotnē tiks izmantots šis palīgmateriāls, un tās kultivēšanas īpašie soļi ir šādi:

1. Sagatavošanās darbs šūnu kultūrai:

1) Sagatavot MEM barotni; augstas kvalitātes liellopu augļa serums, 10%; dubultā antiviela 1%.

2) Kultivēšanas apstākļi: Gāzes fāze: gaiss, 95%; oglekļa dioksīds, 5%. Temperatūra: 37 grādi pēc Celsija, inkubatora mitrums 70%-80%.

3) Sasaldēšanas šķīdums: 90% serums, 10% DMSO, gatavs lietošanai.

2. Šūnu apstrāde:

1) Kriokonservētu šūnu atgūšana: ātri sakratiet un atkausējiet kriokonservētu mēģeni, kurā ir 1 ml šūnu suspensijas, 37°C ūdens vannā, pievienojiet to centrifūgas mēģenei, kurā ir 4-6 ml pilnas barotnes, un samaisiet. labi. Centrifugējiet ar ātrumu 1000 RPM 3-5 minūtes, izmetiet supernatantu un atkārtoti suspendējiet šūnas pilnā barotnē. Pēc tam šūnu suspensiju pievienoja šūnu kultūras kolbai, kas satur 6-8 ml pilnas barotnes, un kultivēja 37 °C temperatūrā nakti. Šūnu augšana un šūnu blīvums tika novērots mikroskopā nākamajā dienā.

2) Šūnu pasāža: Ja šūnu blīvums sasniedz 80%-90%, to var subkultivēt.

3) Šūnu kriokonservēšana: pēc saņemšanas šūnas, ieteicams sasaldēt šūnu sēklu partiju pirmajās 3 kultūras ejās turpmākajiem eksperimentiem.

Iepriekš minētie ir specifiskie soļi kāmja nieru šūnu kultivēšanai šūnu kultūras kolbās. Turklāt, kad šūnas tiek konservētas kriokonservācijā, savāciet sagremotās šūnas centrifūgas mēģenē atbilstoši šūnu caurlaidības procesam un izmantojiet hemocitometru, lai tās skaitītu, lai noteiktu šūnu kriokonservācijas blīvumu. Ieteicamais vispārējo šūnu sasalšanas blīvums ir 1 × 106 ~ 1 × 107 dzīvotspējīgas šūnas/ml.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.