English
Šūnu pasāža attiecas uz kultūras sadalīšanu mazās daļās, atkārtotu iesēšanu citā kultivēšanas traukā un pēc tam kultivēšanu. Šūnu kultūras kolbas ir parasts patērējamais materiāls pasāžas procesā, tāpēc kādi ir specifiskie šūnu pārejas posmi?
1. Izņemiet šūnu kultūras kolbas no inkubatora, izsmidziniet 75% spirtu uz pudeles virsmas ar spirta aerosola kannu un pārnesiet uz īpaši tīru galdu.
2. Atveriet vāku, viegli aspirējiet veco barotni, pievienojiet atbilstošu daudzumu PBS buferšķīduma, lai 1-2 reizes nomazgātu ar Pasteur pipeti, un izmetiet PBS buferšķīdumu.
3. Izmantojiet pipeti, lai pievienotu 1-2 ml pankreatīna un sakratiet "krustu", lai pankreatīns pilnībā saskartos ar šūnām.
4. Pārnesiet šūnu kultūras kolbu ar tripsīnu uz apgrieztā mikroskopa stadiju un novērojiet šūnu gremošanu mikroskopā. Kad šūnas kļūst apaļas un nokrīt lielos daudzumos, sagatavojieties, lai pārtrauktu gremošanu. Apsmidziniet pudeles virsmu ar 75% spirtu un pārnesiet to uz super Net Taiwan.
5. Izmantojiet pipeti (vai Pastēra pipeti), lai pievienotu vienādu daudzumu serumu saturošas barotnes, lai pārtrauktu gremošanu. Rūpīgi ievadiet pipeti, lai šūnas pilnībā nokristu.
6. Pudelē sajaukto šķidrumu pārnes centrifūgas mēģenē, līdzsvaro un centrifugē apmēram 5 minūtes.
7. Pēc centrifugēšanas izsmidziniet centrifūgas mēģenes virsmu ar spirta smidzināšanas kannu, pārnesiet to uz īpaši tīrā galda, atveriet vāku un ielejiet supernatantu atkritumu tvertnē.
8. Pievienojiet atbilstošu daudzumu serumu saturošas barotnes un uzmanīgi pipetē ar pipeti vai Pastēra pipeti, lai izveidotu šūnu suspensiju.
9. Sadaliet šūnu suspensiju 2 (vai vairākās) tīrās sterilās kultivēšanas kolbās, pievienojiet atbilstošu barotnes daudzumu un aizveriet vāku.
10. Novietojiet alikvoto kultivēšanas kolbu uz apgrieztā mikroskopa skatuves un novērojiet šūnu stāvokli. Šūnu skaits ir jāgarantē. Pārāk mazs skaits ietekmēs izaugsmi.
11. Atzīmējiet pudeli, lai norādītu caurbraukšanas laiku, šūnas veidu, operatoru un citu informāciju. Pirms ievietošanas inkubatorā vēlreiz apsmidziniet pudeles korpusa virsmu ar spirtu, notīriet operāciju galdu, noslaukiet īpaši tīrā galda virsmu ar 75% spirtu un notīriet atkritumu šķidrumu un atkritumus.
The iepriekš ir norādīts specifiskais šūnu kultūras kolbas. izmantošanas process šūnu pārejai. Ņemiet vērā, ka darbības laikā ir jāvalkā sterils apģērbs, sterili cimdi un maskas, kā arī visa procesa laikā jāpievērš uzmanība aseptiskām darbībām, lai izvairītos no šūnu piesārņošanas.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.