English
Subkultūra attiecas uz kultūras sadalīšanu mazās daļās, to atkārtotu inokulāciju citā kultūras traukā (pudelē) un pēc tam kultivēšanu. Šūnu kultivēšanas kolbas ir plaši izmantotie palīgmateriāli, kultivējot šūnas. Tātad, kā subkultivēt šūnas kolbā?
Parasti šūnu kultūras kolbās esošās šūnas izaug blīvā vienslānī un būtībā ir piesātinātas. Lai šūnas varētu turpināt vairoties un paplašināt šūnu skaitu, ir jāveic pasāžas. Piekarinātās šūnas var atdalīt tieši, savukārt pielipušās šūnas ir jāsagremo, pirms tās var atdalīt. Parasti proteolītiskos enzīmus (piemēram, tripsīnu) izmanto, lai sagremotu pielipušās šūnas atsevišķās šūnās. Lai uzlabotu gremošanu, var pievienot arī etilēndiamīntetraetiķskābi (EDTA). Vērojiet šūnas, līdz šūnas kļūst apaļas un atdalās no pudeles sienas. Šis process bieži aizņem 5-15 minūtes. Lai izvairītos no šūnu salipšanas, šūnu sagremošanas procesā nepiesitiet šūnu kultūras kolbām.
Īpaši grūti sagremojamām šūnām varat pievienot tripsīna EDTA gremošanas šķīdumu un novietot šūnas 37°C līdz atvieglo gremošanu. Kad šūnas ir atdalītas no pudeles sienas, nekavējoties pievienojiet pilnu barotni, kas satur serumu, lai apturētu gremošanu. Dažas olbaltumvielas serumā var kavēt aizkuņģa dziedzeri. Fermentu aktivitāte. Parasti centrifugēšana nav nepieciešama. Ja šūnām nepieciešama barotne bez seruma vai ar zemu seruma saturu, centrifugējiet ar 125 000 g 5 minūtes, pēc tam izmetiet pārtraukto barotni, pievienojiet atbilstošu jaunu barotni un uzmanīgi samaisiet šūnas pirms subkultūras.
Šūnu caurlaides attiecība parasti ir 1:2. -1:20, atkarībā no šūnas veida. Pārejas procesā tripsīns sabojās dažu šūnu šūnu membrānu. Varat izmantot šūnu skrāpi, lai maigi nokasītu šūnas, pievienotu atbilstošu barotnes daudzumu, viegli ar pipeti sajauktu šūnas un pārnestu tās uz jaunu kultivēšanas kolbu.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.