English
ir šūnu kultūras palīgmateriālu viena slāņa vai daudzslāņu struktūra. Šūnu kultivēšanas procesa laikā mums ir savlaicīgi jāsaprot šūnu augšanas stāvoklis, pirms pāriet uz nākamo darbību. Dzīvotspējīgo šūnu skaitu var noteikt ar tripāna zilo krāsošanu. Konkrētā darbības metode ir šāda:1. Pielipušām šūnām aspirējiet barotni, pievienojiet fermentācijas šķīdumu un sagremojiet inkubatorā atbilstošu laiku. Kad šūnas kļuva apaļas, gremošanu pārtrauca, pievienojot tādu pašu vai lielāku barotnes tilpumu nekā digestāta tilpums. Pēc centrifugēšanas šūnu suspensiju pagatavo ar barotni;cell factory
2. Paņemiet 0,5 ml tripānzilā šķīduma, 0,3 ml PBS un 0,2 ml šūnu suspensijas un labi samaisiet. Pēc tam maisījumu atstāja 1-2 minūtes. Izmantojiet kapilāro pipeti vai 10 ul mazu pipetes galu, lai ievilktu nelielu maisījuma daudzumu un ievadītu to hemocitometrā;
3. Saskaitiet vismaz 1000 šūnas un saskaitiet iekrāsoto šūnu skaitu;
4. Nomazgājiet skaitīšanas plāksni un segstikliņu ar īpaši tīru ūdeni un 75% etanolu;
5. Normālas šūnas netiks iekrāsotas, tikai pēc šūnu nāves palielinās šūnu membrānas caurlaidība, šūnās nokļūst tripāna zils, un šūnas parādās zilā krāsā. Maisījumu nedrīkst likt pārāk ilgi, pretējā gadījumā krāsvielu uzņems arī parastās dzīvās šūnas, kas ietekmēs skaitīšanas precizitāti;
6. Šūnu dzīvotspēja (%) = (kopējais šūnu skaits - iekrāsoto šūnu skaits)/kopējais šūnu skaits*100;
7. Tāpat kā šūnu skaitīšanas metode, arī tripāna zilā krāsošanai ir liela kļūda. Tas var noteikt tikai agrīnu apoptozes līmeni un nevar parādīt atšķirību starp kontroles grupu un eksperimentālo grupu.
Šūnu kultivēšanas procesā šūnu rūpnīcā vienmēr ir dažas šūnas, kas dažādu iemeslu dēļ mirst. Dzīvu šūnu skaita un šūnu dzīvotspējas apgūšana ir galvenā darbība šūnu kultūras eksperimentos un efektīvs veids, kā nodrošināt eksperimenta norisi.
In the process of culturing cells in a cell factory, there are always some cells that die due to various reasons. Mastering the number of living cells and cell viability is a key operation in cell culture experiments and an effective way to ensure the progress of the experiment.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.