Kā kontrolēt tripsīna sagremošanas laiku šūnu kultūras kolbās

Wed May 18 11:45:43 CST 2022

Šūnu kultūra ietver šūnu inokulāciju, kultivēšanu, novākšanu un citus procesus. Šūnas šūnu kultūras kolbas ir zināmā mērā izaugušas, un šūnas ir jānovāc. Šajā laikā šūnas uz kolbas sienas ir jāsagremo ar tripsīnu un pēc tam jānovāc. Pankreatīna lietošanas laikā ir jākontrolē gremošanas laiks.

Tripsīns ir heterogēna proteāze, kas var noārdīt proteīnu uz šūnu membrānas un šūnu kultūras kolbām. Noārdot proteīnu noteiktā vietā, olbaltumvielas savienojuma vietā starp olbaltumvielām tiek noārdītas, un šūnas kļūst sfēriskas to iekšējā citoskeleta spriedzes dēļ, tādējādi atdalot šūnas. Tripsīna sagremošanas pakāpe ir galvenais solis šūnu kultūrā: palielinās pārmērīgi sagremoto šūnu atlieku daudzums, palielinās melnās putas, šūnas nobirs gabalos, kas nopietni ietekmē šūnu dzīvotspēju, un dažas šūnas peld un zaudē kopā ar izmesto tripsīnu; gremošana Nepietiekama, šūnas ir grūti izpūst no pudeles sienas, atkārtota pipetēšana arī sabojās šūnu dzīvotspēju.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Dažādi audi vai šūnas atšķirīgi reaģē uz pankreatīna darbību. Pankreatīna izkliedēto šūnu aktivitāte ir saistīta arī ar tā koncentrāciju, temperatūru un darbības laiku. Kad pH ir 8,0 un temperatūra ir 37, pankreatīna šķīduma iedarbības spēja ir salīdzinoši spēcīga. Lietojot pankreatīnu, jākontrolē koncentrācija, temperatūra un laiks, lai izvairītos no šūnu bojājumiem, ko izraisa pārmērīga gremošana. Tā kā Ca2+, Mg2+, serums un proteīns var samazināt pankreatīna aktivitāti, tad, gatavojot pankreatīna šķīdumu, piemēram, D-Hanks šķīdumu, jālieto BSS bez Ca2+ un Mg2+. Pārtraucot gremošanu, izmantojiet serumu saturošu barotni vai tripsīna inhibitoru, lai apturētu pankreatīna ietekmi uz šūnām.

Turklāt, ja tā ir tikko iegādāta šūna, vispirms varat izmantot zemu tripsīna koncentrāciju, lai noskaidrotu gremošanu. laiku, un katru minūti novērojiet, vai šūnas ir apaļas, un veiciet ierakstu. Īsāk sakot, ievācot šūnas šūnu kultivēšanas kolbas, ir jākontrolē tripsīna sagremošanas laiks, lai saglabātu šūnu dzīvotspēju.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.