Četras mikoplazmas piesārņojuma noteikšanas metodes šūnu rūpnīcās

Wed May 18 11:45:08 CST 2022

Mikoplazmas piesārņojums ir ļoti izplatīta problēma, kultivējot šūnas cell rūpnīcas. Atšķirībā no citiem piesārņojumiem, ar mikoplazmu inficētās šūnas parasti nekļūst duļķainas, tāpēc to ir grūti spriest ar neapbruņotu aci. Ir četri veidi, kā noteikt, vai šūnas ir piesārņotas ar mikoplazmu:

1. DNS fluorescences krāsošana

DNS fluorescences krāsošanas metodes pamatā ir princips, ka fluorescējošā krāsviela Hoechst33258 var saistīties ar AT bāzēm bagāto reģionu mikoplazmas DNS. Fluorescējošie punkti ir mikoplazmas DNS, kas bagāta ar AT bāzes reģioniem.

2. PCR tehnoloģija

Speciālie praimeri ir izstrādāti saskaņā ar konservētajām sekvencēm Mycoplasma genomā, tiek pastiprināta pārbaudāmā parauga nukleīnskābe, un diagnoze tiek veikta, analizējot amplificētā produkta izmēru. PCR noteikšanas tehnoloģija tiek izmantota mikoplazmas piesārņojuma noteikšanai, ar īsu ciklu, augstu jutību, labu specifiskumu, vienkāršu darbību un var noteikt lielu skaitu paraugu vienlaikus.

3. Ar enzīmu saistīto imūnsorbcijas testu (ELISA)

ELISA izmanto, lai noteiktu mikoplazmas piesārņojumu, ar labu specifiskumu un jutīgumu, un tas var pabeigt liela skaita paraugu noteikšanu vienlaikus. Tam ir vienkāršas, ātras un kvantitatīvas kvalitatīvas noteikšanas īpašības.

4. Elektronu mikroskops

Parasti šūnas šūnu rūpnīcās kultivē 48 līdz 72 stundas. Pirms šūnas gandrīz saplūst, šūnas tiek sagremotas ar tripsīnu, lai izveidotu šūnu suspensiju, fiksētas, iegultas un pirms novērošanas sagrieztas.

Iepriekš minētās ir četras parasti izmantotās noteikšanas metodes, nosakot mikoplazmas piesārņojumu šūnu rūpnīcās. Pašlaik ir zināmi vairāk nekā 20 mikoplazmu veidi, kas piesārņo šūnas, no kurām vairāk nekā 95% ir perorālas mikoplazmas, tāpēc operatoriem, kultivējot šūnas, jāpievērš uzmanība aseptiskai darbībai.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.