English
The šūnu kultūras plateir sava veida bioloģisks instruments. Pēc formas tas ir sadalīts plakanā dibenā un apaļajā dibenā. Iedobumu skaits ietver 6 iedobes, 12 iedobes, 24 iedobes, 48 iedobes, 96 iedobes, 384 iedobes utt. To galvenokārt izmanto šūnu kultūrai un var izmantot arī mērīšanai. olbaltumvielu koncentrācija, MTT noteikšanai parasti izmanto 96 iedobju plates.
MTT metode, kas pazīstama arī kā MTT kolorimetriskā metode ir metode šūnu izdzīvošanas un augšanas noteikšanai. Noteikšanas princips ir tāds, ka dzīvo šūnu mitohondrijās esošā sukcināta dehidrogenāze var reducēt eksogēno MTT līdz ūdenī nešķīstošam zili violetam kristāliskam formazānam (Formazan) un nogulsnēt to šūnās, savukārt atmirušajām šūnām šādas funkcijas nav. Dimetilsulfoksīds (DMSO) var izšķīdināt formazānu šūnās, un tā gaismas absorbcijas vērtību mēra pie 570 nm ar enzīmu saistītu imūntestu, kas var netieši atspoguļot dzīvo šūnu skaitu. Noteiktā šūnu skaita diapazonā MTT kristālu veidošanās daudzums ir proporcionāls šūnu skaitam. Atklāšanas darbības ir šādas:
1.
Kultivējiet šūnas 96 bedrīšu šūnu kultūras plate. Kad šūnu blīvums ir atbilstošs, pievienojiet 50 ul MTT katrai iedobei un turpiniet kultivēt 4 stundas;
2.
Iesūc MTT saturošo barotni un pievieno 150 ul DMSO. Vibrējiet horizontāli 10 minūtes, lai kristāli pilnībā izšķīdinātu. Suspendētām šūnām pēc centrifugēšanas izsūciet barotni un pēc tam pievienojiet DMSO, lai izšķīdinātu;
3. Izmēriet absorbciju pie 550 nm ar enzīmu saistītā imūntesta instrumentā (iestatiet saprātīgu kontroles grupu un tukšo grupu);
4. Šūnu izdzīvošanas rādītājs=eksperimentālās grupas absorbcijas vērtība/kontrolgrupas absorbcijas vērtība*100%.
Operācijas laikā jāņem vērā, ka MTT ir kancerogēna. Ja iespējams, mēģiniet valkāt caurspīdīgas plēves cimdus. Sagatavotajam MTT jābūt sterilam. MTT ir ļoti jutīgs pret baktērijām. Nav nozīmes tam, vai pievienojat 96 iedobju šūnu kultūras plāksni, neaizsargājot to no gaismas. , Galu galā laiks ir mazs, vai arī varat izslēgt apgaismojumu konsolē.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.