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용원성 박테리아는 염색체에 통합된 프로파지를 갖고 용해되지 않고 정상적으로 성장 및 번식할 수 있는 박테리아를 지칭한다. 온화한 박테리오파지는 형질도입, 유전 공학 벡터 및 분자 생물학 분야에서 널리 사용되었습니다. cell culture flask는 박테리아의 용원성을 확인하는 데 사용할 수 있습니다. 구체적인 조작 방법은
1입니다. 용원균 배양: LB 기울기에 의해 활성화된 E. coli 225(λ)를 20ml LB 배양액이 담긴 250ml 세포 배양 플라스크에 접종하고 30℃에서 16시간 동안 진탕 배양한 후 2ml 세균 현탁액을 취하여 그것을 다른 것과 연결하십시오. 20ml의 LB 브로쓰가 들어 있는 250ml 삼각 플라스크에서 37°C에서 2시간 동안 진탕하면서 대수 단계로 배양합니다.
2. 유리 파지 제외: 검사할 균주가 바실러스인 경우 포자 현탁액으로 만든 다음 80°C에서 10분간 처리하여 용원균 표면에 흡착되어 있을 수 있는 파지를 죽일 수 있습니다. 시험할 균주가 간균이 아닌 경우 파지 또는 0.2% 시트르산나트륨 용액으로 제조한 항혈청을 사용하여 대수기 리소겐 세포를 세척하여 표면 흡착 및 유리 파지를 제거합니다. 4000r/min에서 10분 동안 원심분리한 후 상층액에 이중층 평판 측정을 위한 민감한 지표 박테리아를 첨가할 수 있습니다. 원심분리 후 파지 세포를 유도합니다.
3. 용원균 유도: 원심분리 후 채취한 균을 멸균 생리식염수로 2회 세척하여 최종 농도가 1011 cells/ml가 되도록 생리식염수 또는 100mmol/l Tris-HCL 완충액(pH7.0)을 첨가하여 세균 현탁액을 첨가한다. 각 접시에 세균 현탁액 5ml를 넣고 30W UV 램프를 30cm 거리에서 30초 동안 조사하고 즉시 이중 농도 LB 배양 용액 5ml를 추가하고 잘 혼합하고 37°C에서 2시간 동안 암실에서 배양합니다. 4. 용원성 균주의 검사 : 이중층 한천법에 따라 조작하고 상기 유도 용해물에 클로로포름 몇 방울을 첨가하고 10배 희석법으로 적절하게 희석한다. 3가지 희석액을 선택하여 각 희석액에 대해 0.3ml씩 취한다. 대수상 민감성 대장균 226 균 현탁액 0.2ml와 잘 섞은 다음 녹여 45°C로 냉각한 LB 반체 배지를 첨가하고 즉시 혼합한 다음 LB 고체 배지 플레이트에 붓습니다. 응고 후 37 ℃에서 6시간 동안 배양하고 관찰합니다. 배양 플레이트에 많은 플라크가 나타나면 검사한 균주가 라이소젠임을 증명합니다.
세균이 라이소젠성을 가지고 있는지 확인하려면 위의 단계를 따르십시오. 테스트 결과에 영향을 미치는 부적절한 작동을 피하기 위해 작동 중 프로세스의 무균 상태에 주의하십시오.
To check whether the bacteria have lysogenicity, follow the above steps. Pay attention to the sterility of the process during operation to avoid improper operation that affects the test results.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.