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세포 용해는 세포 투과성과 활성을 변화시키는 중요한 실험 방법입니다. 세포가 바이러스에 감염되면 바이러스가 숙주 세포의 영양분을 이용하여 자신의 자손을 합성한 다음 바이러스 자손이 숙주 세포를 파괴하고 세포 밖으로 방출하는 것을 의미합니다. 세포 용해 실험에서 세포 배양 플라스크는 일반적인 소모품입니다. 세포 용해 단계는 다음과 같습니다:
1. 배양액을 붓고 흡수지가 배양액을 흡수할 수 있도록 세포 배양병을 흡수지에 거꾸로 뒤집습니다(또는 잔류 배양액이 병 바닥으로 흐르도록 잠시 병을 세워둡니다. 그런 다음 피펫을 사용하여 빨아냅니다. ).
2. 세포의 각 병에 미리 냉각된 4℃ PBS(0.01M pH7.2~7.3) 3ml를 추가합니다. 세포를 평평하게 놓고 1분 동안 부드럽게 흔들어 세포를 세척한 다음 세척액을 버립니다. 위의 작업을 2회 반복하고 세포를 3회 세척하여 배양액을 씻어냅니다. PBS를 버리고 배양 플라스크를 ice.
3에 놓습니다. 1ml lysis buffer에 10ul PMSF(100mM)를 넣고 잘 흔든 후 얼음 위에 올려 놓습니다. (PMSF는 용해 용액과 혼합하기 전에 결정이 없을 때까지 흔들어야 합니다.)
4. 각 세포 플라스크에 PMSF가 포함된 용해 완충액 400ul를 넣고 얼음 위에서 30분간 용해합니다. 세포를 완전히 용해시키기 위해서는 플라스크를 자주 흔들어야 합니다.
5. 용해 후 깨끗한 스크레이퍼를 사용하여 배양 플라스크의 한쪽에 있는 세포를 긁어낸 다음(동작이 빨라야 함) 총을 사용하여 세포 파편을 이동하고 용해물을 1.5ml 원심분리 튜브로 이동합니다. (전체 작업은 최대한 빙판 위에서 해야 합니다.)
6. 5분 동안 4°C에서 12000rpm으로 원심분리합니다. (미리 냉각하기 위해 원심분리기를 켜십시오)
7. 원심분리한 상층액을 원심분리기 튜브에 0.5분간 옮겨 -20°C에서 보관합니다. , HEK 293 세포, CAR-T 세포, CHO 세포, 곤충 세포 등
Cell culture flasks세포 배양 플라스크
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.