MTT検出における細胞培養プレートの応用

Wed May 18 17:14:42 CST 2022

細胞培養プレート一種の生物学的ツールです。形状により平底と丸底に分かれています。ウェル数は、6ウェル、12ウェル、24ウェル、48 ​​ウェル、96ウェル、384ウェルなどです。主に細胞培養に使用され、測定にも使用できます。タンパク質濃度、96ウェルプレートは一般的にMTT検出に使用されます。

MTT法はMTT比色法とも呼ばれ、細胞の生存と増殖を検出する方法です。検出原理は、生細胞のミトコンドリアにあるコハク酸デヒドロゲナーゼが外因性MTTを水不溶性の青紫色結晶ホルマザン(ホルマザン)に還元して細胞に沈着させることができるが、死んだ細胞にはそのような機能がないということです。ジメチルスルホキシド(DMSO)は細胞内のホルマザンを溶解することができ、その光吸収値は、生細胞の数を間接的に反映できる酵素結合免疫測定法を使用して570nmで測定されます。細胞数の特定の範囲内で、MTT結晶形成の量は細胞数に比例します。検出手順は次のとおりです:

1。 96ウェル細胞培養プレートで細胞を培養します。細胞密度が適切になったら、各ウェルに50ul MTTを加え、4時間培養を続けます;

2。 MTTを含む培地を吸い取り、150ulのDMSOを加えます。結晶を完全に溶解するために10分間水平に振動させます。浮遊細胞の場合、遠心分離後、培地を吸い取り、次にDMSOを加えて溶解します;  3。酵素免疫測定装置で550nmの吸光度を測定します(妥当なコントロールグループとブランクグループを設定します)。

4。細胞生存率=実験群の吸光度値/対照群の吸光度値*100%。

MTTは発がん性があることに注意してください。可能であれば、ある種の透明なフィルム手袋を着用してみてください。準備されたMTTは無菌である必要があります。 MTTはバクテリアに非常に敏感です。光から保護せずに96ウェル細胞培養プレートに追加しても問題ありません。 、結局のところ、時間が短いか、コンソールの照明をオフにすることができます。

It should be noted during the operation that MTT is carcinogenic. If possible, try to wear the kind of transparent film gloves. The prepared MTT needs to be sterile. MTT is very sensitive to bacteria. It does not matter if you add to the 96-well cell culture plate without protecting it from light. , After all, the time is short, or you can turn off the lighting on the console.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.