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Quando si utilizza flaconi di coltura cellulare per coltivare le cellule, a volte si verifica una contaminazione cellulare. Come rimediare questa volta?
Abbiamo immediatamente scartato il terreno nel flacone di coltura cellulare, sciacquato 2~3 volte con PBS, aggiunto tripsina fino a quando la morfologia cellulare è cambiata leggermente ma non abbiamo lasciato il contenitore, scartato la tripsina e aggiunto PBS per risciacquare delicatamente una volta;
Aggiungere 20× doppio anticorpo al pallone di coltura cellulare, immergere le cellule per 3~5 minuti, scartare il doppio anticorpo e aggiungere terreno fresco completo (contenente 10× doppio anticorpo) per 12 ore;
FuDau T25 Cell Culture Flasks
Dopo 12 ore, scartare il terreno e lavarlo con PBS per 2~3 volte, quindi aggiungere il terreno completo (contenente 10× doppio anticorpo) e centrifugare a bassa velocità durante il passaggio (se la centrifugazione viene solitamente eseguita a 1000 giri/min, può essere ridotta a 800~900 giri/min). centrifugazione minima) e coltivato in terreno contenente 10× doppio anticorpo.
Se non si trovano batteri al microscopio posteriore di seconda generazione, la terza generazione può essere coltivata normalmente. Se non c'è rimbalzo dopo 48 ore di coltura normale, la contaminazione può essere considerata eliminata.
In caso di contaminazione da muffe, cambiare il terreno dopo aver sciacquato con PBS per 2 o 3 volte, senza aggiungere doppio anticorpo ad alta concentrazione . Dopo 48 ore di coltura, la contaminazione non è più ricomparsa.
FuDau T75 Cell Culture Flasks
In caso di contaminazione fungina, è possibile aggiungere amfotericina B dopo il risciacquo con PBS e aver cambiato il terreno (l'amfotericina B è citotossica e non è consigliata) , oppure 300 μg/mL di fluconazolo possono essere aggiunti per la coltura e 150 μg possono essere utilizzati dopo il controllo della contaminazione. /mL in coltura per 2~3 passaggi.
Se si sospetta una contaminazione da micoplasma, è possibile eseguire il rilevamento tramite PCR o utilizzare direttamente un reagente per la rimozione del micoplasma (ad es. un Hengbi). L'iniezione di ciprofloxacina può anche essere acquistata, aperta nel banco ultra pulito e aggiunta direttamente al terreno di coltura. Dopo 2 generazioni a una concentrazione di 20 μg/mL, la concentrazione di 10 μg/mL è stata utilizzata per la coltura continua per circa 2 settimane.
Quanto sopra è come porre rimedio alla contaminazione cellulare quando si utilizzano fiasche per colture cellulari per coltivare cellule.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.