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Il erlenmeyer shake flask è un contenitore di coltura cellulare triangolare, utilizzato principalmente per coltivare varie cellule in sospensione o conservare e preparare il terreno. Dopo che le cellule sono cresciute fino a un certo punto, dobbiamo subcoltivarle, quindi come farlo nello specifico?
Poiché le cellule sono già sospese nel mezzo di crescita, non è necessario che gli enzimi staccarli dalla superficie del recipiente di coltura e il metodo è semplice. Per prima cosa preparare la fiaschetta di erlenmeyer con le cellule sospese; preriscaldare il mezzo di crescita completo a 37°C; riempire l'incubatore a 37°C con aria umidificata al 5% di anidride carbonica. Ci sono due modi per subcoltivare le cellule in sospensione:
125ml-Erlenmeyer-Shake-Flasks
1. Metodo di trasmissione diretta
1. Quando le cellule in sospensione crescono all'80%-90% (la sospensione cellulare diventa gialla), possono essere sottocoltivate;
2. Eliminare 1/2-1/3 della sospensione cellulare con una pipetta;
3. Aggiungere una quantità appropriata di terreno fresco e continuare a coltivare.
2. Metodo di passaggio centrifugo (nel caso di detriti cellulari trovati)
1000ml-Erlenmeyer-Shake-Flasks
1. Trasferire la sospensione cellulare in una provetta da centrifuga;
2. Centrifugare a 150 g per 5 min, eliminare il supernatante;
3. Utilizzare terreno fresco per risospendere le cellule;
4. Prelevare una quantità appropriata di sospensione cellulare con la pipetta, metterla in una nuova fiasca agitata di Erlenmeyer, quindi aggiungere una quantità appropriata di terreno fresco per continuare la coltura.
Quanto sopra è l'operazione di sottocoltura delle cellule di sospensione in fiasca agitata di Erlenmeyer . Durante l'operazione, dobbiamo attuare rigorosamente il funzionamento asettico per evitare di introdurre inquinamento esterno e influire sulla crescita cellulare.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.