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Quando si utilizza erlenmeyer shake flasks per la produzione di fermentazione delle cellule in sospensione CHO, è necessario eseguire la stabilità del passaggio della linea cellulare, quindi avremo diverse domande quando le cellule vengono passate. Oggi, insieme a voi, risponderò brevemente a queste domande.
1. Quante generazioni sono appropriate per l'esperimento di stabilità del passaggio?
Dipende dal futuro ciclo di produzione. Ad esempio, qual è il tempo dall'inizio del recupero delle celle al completamento di un lotto di produzione e la stabilità dovrebbe essere almeno maggiore di questo tempo. Per l'affidabilità del progetto di produzione, si raccomanda di raddoppiare il tempo di stabilità del ciclo di produzione, in modo da poter vedere una tendenza al cambiamento del livello di espressione della linea cellulare. La linea cellulare mostrerà una tendenza al ribasso con il passare del tempo.
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2. Per testare la stabilità dell'espressione della proteina bersaglio, per quanto tempo deve essere coltivato ogni passaggio di cellule per il campionamento? Ogni generazione di cellule deve essere alimentata e coltivata per mezzo mese prima del test?
Non è necessario farlo ogni generazione. Basta fare qualche articolo per vedere il trend di espressione stabile (ma non puoi fare due o tre articoli per non vedere il trend).
3. Per testare la stabilità genetica delle cellule, quanto tempo ci vuole per estrarre il DNA per ogni generazione di coltura cellulare?
Questo può essere fatto nello stesso ciclo del secondo punto di alimentazione della coltura.
1000ml-Erlenmeyer-Shake- Boccette
4. Esiste un protocollo dettagliato per l'esperimento di stabilità del passaggio a cui puoi fare riferimento?
La stabilità si concentra principalmente sulla stabilità del livello di espressione della linea cellulare, sulla stabilità dell'attività proteica e sulla stabilità genetica della cellula. Questi hanno lo scopo di dimostrare che sei stabile nella produzione in seguito.
5. Se usi erlenmeyer shake flask, allora non hai bisogno di costruire una banca, e puoi inoculare direttamente in un shake flask per iniziare la coltura fedbatch?
Anche se si usa erlenmeyer shake flask, è necessario costruire un libreria e la valutazione della stabilità è la libreria MCB e WCB, non semplicemente valutando la linea cellulare.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.