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Rilevazione dell'attività delle cellule nelle fabbriche di cellule - metodo MTT

Mon Dec 05 11:53:49 CST 2022

Il cell factory è un materiale di consumo che viene spesso utilizzato per la coltura cellulare aderente. Durante l'esperimento, dobbiamo cogliere lo stato di crescita delle cellule in tempo reale e apportare modifiche rilevanti in base alla situazione specifica. La vitalità cellulare può essere rilevata con il metodo MTT per determinare la crescita cellulare.

Il metodo MTT, noto anche come metodo colorimetrico MTT, è un metodo per rilevare la sopravvivenza e la crescita cellulare. Il principio di rilevamento è che la succinato deidrogenasi nei mitocondri delle cellule viventi può ridurre l'MTT esogeno a formazan cristallino blu-viola insolubile in acqua e depositarsi nelle cellule, mentre le cellule morte non hanno tale funzione. Il dimetilsolfossido (DMSO) può dissolvere il formazano nelle cellule e il suo valore di assorbimento della luce può essere misurato mediante test di immunoassorbimento enzimatico a una lunghezza d'onda di 570 nm, che può riflettere indirettamente il numero di cellule viventi. All'interno di un certo intervallo di numeri di cellule, la quantità di formazione di cristalli MTT è proporzionale al numero di cellule. Questo metodo è stato ampiamente utilizzato nella rilevazione dell'attività di alcuni fattori biologicamente attivi, screening di farmaci antitumorali su larga scala, test di citotossicità e test di radiosensibilità tumorale. È caratterizzato da elevata sensibilità ed economia.

Prima di testare la vitalità delle cellule nella fabbrica cellulare, un passo molto importante è la formulazione di MTT. Tipicamente, la concentrazione di MTT in questo metodo è di 5 mg/ml. Pertanto, 0,5 g di MTT possono essere pesati, sciolti in 100 ml di tampone fosfato salino (PBS) o mezzo privo di rosso fenolo, filtrati con un filtro da 0,22 μm per rimuovere i batteri nella soluzione e conservati a 4°C al buio . . Durante la preparazione e la conservazione, cerca di avvolgere il contenitore con un foglio di alluminio.

Quando si utilizza il metodo MTT per misurare l'attività cellulare nella fabbrica cellulare, va notato che l'MTT è cancerogeno, quindi fai attenzione quando lo usi. Questo metodo può essere utilizzato solo per rilevare il numero di cella relativo e la vitalità relativa, ma non il numero di cella assoluto. Quando si testano i risultati con un lettore di micropiastre, al fine di garantire la linearità dei risultati sperimentali, l'assorbanza MTT dovrebbe essere compresa nell'intervallo 0-0,7 il più possibile.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.