English
Efni og aðferðir
3.1. Shake Flask Cultivations
Forræktir MDCK.SUS2 sviflausnarfrumna voru ræktaðar í shaker flasks (125 ml polycarbonate Erlenmeyer flöskur, #431143, Corning®, New York borg, NY, USA) með 50 ml vinnurúmmáli (wv) , í Multitron Pro útungunarvél (Infors HT, Bottmingen, Sviss) við 37 °C og 5% CO2 andrúmsloft með hristingstíðni 180 rpm. Frumur voru teknar í gegnum 3–4 daga fresti með sáningarþéttleika 0,5–0,8 × 106 frumur/ml.
IAV A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) fræveira var notuð við sýkingu, mynduð í viðloðandi MDCK frumum (ECACC # 84121903). Frævírusinn hafði títra upp á 1,1 × 109 TCID50/ml.
Frumur voru ræktaðar í efnafræðilega skilgreindum, próteinlausum og dýraþáttalausum miðli, Smif8 (Smif8 PGD 2×, bætt við 5 mM glútamíni og 8 mM pyruvate), sérstaklega þróað til að rækta sviflausn MDCK frumna [95].
Vaxtar- og sýkingartilraunir til að sannprófa líkana voru gerðar með því að nota 500 ml hristiflöskur (#4113-0500, Nalgene™, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) með upphaflegt ræktunarrúmmál 200 ml við 150 snúninga á mínútu. Tvær ræktanir voru gerðar, ein sýndarsýking (ræktun 1), þar sem frumur óx í um 200 klst, og ein sýking (ræktun 2), þar sem frumur voru sýktar af IAV um 49 klst. eftir sáningu. Til að ná fram samstilltri sýkingu í frumustofninum var notað moi = 10. Vegna tiltölulega lágs frumustyrks á sýkingartíma (2,1 × 106 frumur/ml) og mikils magns sem notað var, var hvorki nauðsynlegt að skipta út miðli né trypsíni (til veiruvirkjunar). Í báðum ræktunum var dauðhreinsuðu Milli-Q vatni bætt við fyrir sýnatöku til að vega upp á móti uppgufun vatns (1–2 ml/dag) þar sem tilraunin var gerð í óvökvaðri hitakassa.
Heimild frá: https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.