Undirræktun vísar til þess ferlis að skipta menningunni í litla hluta, sáð þá aftur í annað ræktunarílát (flösku) og síðan ræktað. Frumuræktunarflöskur eru almennt notaðar rekstrarvörur við ræktun frumna. Svo, hvernig á að undirrækta frumurnar í flöskunni?
Almennt vaxa frumurnar í frumuræktarflöskunum í þétt einlag og eru í grundvallaratriðum mettaðar. Til þess að gera frumunum kleift að halda áfram að fjölga sér og stækka fjölda frumna er nauðsynlegt að framkvæma yfirferðaraðgerðir. Hægt er að aðskilja sviffrumur beint, en viðloðandi frumur þarf að melta áður en hægt er að aðskilja þær. Almennt eru próteinleysandi ensím (eins og trypsín) notuð til að melta viðloðandi frumur í stakar frumur. Einnig er hægt að bæta etýlendiamíntetraediksýru (EDTA) til að bæta meltingu. Fylgstu með frumunum þar til frumurnar verða kringlóttar og losna frá flöskuveggnum. Þetta ferli tekur oft 5-15 mínútur. Til að koma í veg fyrir frumukekki skaltu ekki banka á frumuræktunarflöskurnar á meðan á meltingu frumanna stendur.
Fyrir sérstaklega erfiðar meltanlegar frumur er hægt að bæta trypsín EDTA meltingarlausn og setja frumurnar við 37°C til að auðvelda meltingu. Eftir að frumurnar hafa verið aðskildar frá flöskuveggnum skaltu strax bæta við fullkomnu miðli sem inniheldur sermi til að stöðva meltinguna. Ákveðin prótein í sermi geta hamlað brisi. Ensímvirkni. Almennt séð er skilvindu ekki nauðsynleg. Ef frumurnar þurfa sermislausan eða lágsermimiðil, skilið þá við 125000g í 5 mínútur, fargið síðan efnið sem hætt er að nota, bætið við viðeigandi nýjum miðli og blandið frumunum varlega saman fyrir undirræktun.
Hlutfall frumna er almennt 1:2 -1:20, fer eftir frumugerð. Í leiðinni mun trypsín skemma frumuhimnu sumra frumna. Þú getur notað frumusköfu til að skafa frumurnar varlega, bæta við viðeigandi magni af miðli, pípetta varlega til að blanda frumunum saman og flytja þær í nýja ræktunarflösku.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.