सेल कल्चर फ्लास्क में हम्सटर किडनी कोशिकाओं को विकसित करने के लिए विशिष्ट कदम

विभिन्न कोशिकाओं का संवर्धन करते समय, सेल कल्चर फ्लास्क एक प्रकार की कोशिका संवर्धन उपभोग्य वस्तुएं होती हैं जिनका अधिक बार उपयोग किया जाता है। वे ज्यादातर अनुयाई कोशिकाओं की संस्कृति के लिए उपयोग किए जाते हैं, और विनिर्देश 25ml से 225ml तक होते हैं। हम्सटर किडनी सेल कल्चर माध्यम इस उपभोज्य का उपयोग करेगा, और इसकी संस्कृति के विशिष्ट चरण इस प्रकार हैं:

1। सेल कल्चर के लिए प्रारंभिक कार्य:

1) एमईएम माध्यम तैयार करें; उच्च गुणवत्ता वाले भ्रूण गोजातीय सीरम, 10%; डबल एंटीबॉडी 1%.

2) संस्कृति की स्थिति: गैस चरण: वायु, 95%; कार्बन डाइऑक्साइड, 5%। तापमान: 37 डिग्री सेल्सियस, इनक्यूबेटर आर्द्रता 70% -80%।

3) बर्फ़ीली समाधान: 90% सीरम, 10% डीएमएसओ, उपयोग के लिए तैयार।

2। सेल प्रोसेसिंग:

1) क्रायोप्रिजर्व्ड सेल्स की रिकवरी: क्रायोप्रेजर्व्ड ट्यूब को 37 डिग्री सेल्सियस वॉटर बाथ में 1 एमएल सेल सस्पेंशन वाली क्रायोप्रेजर्व्ड ट्यूब को जल्दी से हिलाएं और पिघलाएं, इसे एक सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में डालें जिसमें 4-6 एमएल का पूरा माध्यम हो और मिक्स करें। कुंआ। 3-5min के लिए 1000RPM पर अपकेंद्रित्र, सतह पर तैरनेवाला त्यागें, और कोशिकाओं को पूर्ण माध्यम में फिर से निलंबित करें। सेल सस्पेंशन को तब सेल कल्चर फ्लास्क में जोड़ा गया था जिसमें 6-8 मिली पूर्ण माध्यम था और रात भर 37 डिग्री सेल्सियस पर सुसंस्कृत किया गया था। कोशिका वृद्धि और कोशिका घनत्व अगले दिन एक माइक्रोस्कोप के तहत देखा गया।

2) कोशिका मार्ग: यदि कोशिका घनत्व 80% -90% तक पहुँच जाता है, तो इसे उपसंस्कृत किया जा सकता है। कोशिकाओं, बाद के प्रयोगों के लिए संस्कृति के पहले 3 मार्ग में सेल बीजों के एक बैच को फ्रीज करने की सिफारिश की जाती है।

उपरोक्त सेल कल्चर फ्लास्क में हम्सटर किडनी कोशिकाओं की खेती के लिए विशिष्ट कदम हैं। इसके अलावा, जब कोशिकाओं को क्रायोप्रेजर्व किया जाता है, तो पचे हुए कोशिकाओं को कोशिका मार्ग की प्रक्रिया के अनुसार एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में इकट्ठा करें, और कोशिकाओं के क्रायोप्रेज़र्वेशन घनत्व को निर्धारित करने के लिए उन्हें गिनने के लिए एक हेमोसाइटोमीटर का उपयोग करें। सामान्य कोशिकाओं का अनुशंसित हिमीकरण घनत्व 1×106~1×107 व्यवहार्य कोशिकाएं/एमएल है।

The above are the specific steps for culturing hamster kidney cells in cell culture flasks. In addition, when cells are cryopreserved, collect the digested cells into a centrifuge tube according to the process of cell passage, and use a hemocytometer to count them to determine the cryopreservation density of cells. The recommended freezing density of general cells is 1×106~1×107 viable cells/ml.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.