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सामग्री और तरीके
3.1. शेक फ्लास्क कल्टीवेशन
MDCK की पूर्व-संस्कृतियां। SUS2 निलंबन कोशिकाओं को कोशिकाओं को रासायनिक रूप से परिभाषित, प्रोटीन-मुक्त और पशु घटक-मुक्त माध्यम, Smif8 (Smif8 PGD 2×, 5 mM ग्लूटामाइन के साथ पूरक, और 8) में विकसित किया गया था। एमएम पाइरूवेट), विशेष रूप से निलंबन एमडीसीके कोशिकाओं [95] की खेती के लिए विकसित किया गया है। यूएसए) 150 आरपीएम पर 200 एमएल की प्रारंभिक खेती की मात्रा के साथ। दो खेती की गई, एक नकली-संक्रमण (खेती 1), जहां कोशिकाएं लगभग 200 घंटे तक बढ़ीं, और एक संक्रमण (खेती 2), जहां कोशिकाओं को लगभग 49 घंटे के बाद टीकाकरण में IAV से संक्रमित किया गया था। सेल आबादी के एक तुल्यकालिक संक्रमण को प्राप्त करने के लिए, एक moi = 10 का उपयोग किया गया था। संक्रमण के समय अपेक्षाकृत कम सेल सांद्रता (2.1 × 106 कोशिकाओं/एमएल) और उच्च moi के इस्तेमाल के कारण, न तो मध्यम प्रतिस्थापन और न ही ट्रिप्सिन जोड़ (वायरस सक्रियण के लिए) आवश्यक था। दोनों खेती में, पानी के वाष्पीकरण (1-2 एमएल / दिन) की भरपाई के लिए नमूना लेने से पहले बाँझ मिलि-क्यू पानी जोड़ा गया था क्योंकि प्रयोग एक गैर-हाइड्रेटेड इनक्यूबेटर में किया गया था। (125 एमएल पॉली कार्बोनेट एर्लेनमेयर फ्लास्क, #431143, कॉर्निंग®, न्यूयॉर्क शहर, एनवाई, यूएसए) में 50 एमएल वर्किंग वॉल्यूम (डब्ल्यूवी) के साथ उगाया गया था। , एक मल्टीट्रॉन प्रो इनक्यूबेटर (इन्फोर्स एचटी, बॉटमिंगन, स्विटजरलैंड) में 37 डिग्री सेल्सियस और 5% सीओ 2 वातावरण में 180 आरपीएम की झटकों की आवृत्ति के साथ। कोशिकाओं को हर 3-4 दिनों में 0.5-0.8 × 106 कोशिकाओं / एमएल के सीडिंग घनत्व के साथ पारित किया गया था। अनुयाई MDCK कोशिकाओं में (ECACC # 84121903)। बीज विषाणु का अनुमापांक 1.1 × 109 TCID50/mL.
स्रोत:
https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
Growth and infection experiments for model validation were performed using 500 mL shaking flasks (#4113-0500, Nalgene™, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) with an initial cultivation volume of 200 mL at 150 rpm. Two cultivations were performed, one mock-infection (Cultivation 1), where cells grew for about 200 h, and one infection (Cultivation 2), where cells were infected with IAV at about 49 h post inoculation. To achieve a synchronous infection of the cell population, a moi = 10 was used. Due to the relatively low cell concentration at time of infection (2.1 × 106 cells/mL) and the high moi used, neither medium replacement nor trypsin addition (for virus activation) was necessary. In both cultivations, sterile Milli-Q water was added before sampling to compensate for water evaporation (1–2 mL/day) since the experiment was performed in a non-hydrated incubator.
Source from: https://www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.