ई. कोलाई कालोनियों का पता लगाने के लिए सेल कल्चर फ्लास्क का उपयोग कैसे करें

कोलीफॉर्म बैक्टीरिया ग्राम-नकारात्मक गैर-बैसिलस बैक्टीरिया के एक समूह को संदर्भित करता है जो लैक्टोज को किण्वित कर सकता है, एसिड और गैस, एरोबिक और वैकल्पिक एनारोबिक का उत्पादन कर सकता है। व्यावहारिक अनुप्रयोगों में, यह अक्सर एक संकेतक के रूप में प्रयोग किया जाता है कि क्या भोजन मल से दूषित होता है। सभी पता लगाने के तरीकों में, पता लगाने के लिए सेल कल्चर फ्लास्क का उपयोग अधिक सामान्यतः उपयोग किया जाता है। ऑपरेशन के चरण इस प्रकार हैं:

1। नमूनाकरण और तनुकरण

(1) सड़न रोकनेवाला विधि के अनुसार, परीक्षण नमूने के 25g (या 25mL) को एक सेल कल्चर फ्लास्क में डालें जिसमें 225mL बाँझ पानी (फ्लास्क में कांच के मोतियों की उचित संख्या पूर्व निर्धारित) या एक निष्फल मोर्टार हो, और इसे अच्छी तरह से हिलाएं। या 1:10 का एक समान पतलापन बनाने के लिए पीस लें। ठोस नमूनों के लिए एक बाँझ होमोजेनाइज़र का उपयोग करना और 1:10 कमजोर पड़ने के लिए 1 मिनट के लिए 8000～10000r/min की गति से सेंट्रीफ्यूज का उपयोग करना सबसे अच्छा है।

(2) 1mL बाँझ पुआल का उपयोग करें 1:10 तनुकरण के 1 मिली को चूसने के लिए, इसे 9 मिली बाँझ पानी वाली एक परखनली में डालें, हिलाएँ और मिलाकर 1:100 तनुकरण करें, 1mL बाँझ पुआल से बदलें, दबाएँ उपरोक्त ऑपरेशन क्रमिक रूप से 10 बार सीरियल dilutions किए जाते हैं .

(3) खाद्य स्वच्छता आवश्यकताओं या परीक्षण नमूनों के संदूषण के अनुमान के अनुसार, तीन तनुकरणों का चयन करें और प्रत्येक तनुकरण के लिए 3 ट्यूबों को टीका लगाएं। इसे सीधे नमूने के साथ भी लगाया जा सकता है।

2। लैक्टोज का प्रारंभिक किण्वन परीक्षण

इसे आमतौर पर काल्पनिक परीक्षण के रूप में जाना जाता है। इसका उद्देश्य बैक्टीरिया के लिए नमूने की जांच करना है जो गैस का उत्पादन करने के लिए लैक्टोज को किण्वित करता है। परीक्षण किए जाने वाले नमूने को लैक्टोज पित्त नमक किण्वन ट्यूब में टीका लगाया जाता है, डबल लैक्टोज पित्त नमक किण्वन ट्यूब का उपयोग 1 एमएल से ऊपर के इनोकुलम के लिए किया जाता है; एकल लैक्टोज पित्त नमक किण्वन ट्यूब का उपयोग 1 एमएल और 1 एमएल से कम के लिए किया जाता है। प्रत्येक कमजोर पड़ने के लिए 3 ट्यूबों को टीका लगाएं और उन्हें 24 ± 2 घंटे के लिए 36 ± 1 ℃ इनक्यूबेटर में रखें। यदि सभी लैक्टोज पित्त नमक किण्वन ट्यूब गैस का उत्पादन नहीं करते हैं, तो इसे कोलीफॉर्म बैक्टीरिया के लिए नकारात्मक बताया जा सकता है। यदि गैस का उत्पादन हो रहा है, तो नीचे दी गई प्रक्रिया का पालन करें।

3. सेपरेशन कल्चर

गैस बनाने वाली किण्वन ट्यूबों को इओसिन मेथिलीन ब्लू एगर प्लेट्स पर स्ट्रीक और टीका लगाया गया था, और एक इनक्यूबेटर में 36 ± 1 डिग्री सेल्सियस पर 18-24 घंटों के लिए सुसंस्कृत किया गया था। फिर, कॉलोनी आकारिकी देखी गई और ग्राम धुंधला, सूक्ष्म परीक्षण और पुन: किण्वन परीक्षण किया गया।

4। लैक्टोज डबल किण्वन परीक्षण

तथाकथित पुष्टिकरण परीक्षण, जिसका उद्देश्य यह साबित करना है कि टेस्ट ट्यूब से अलग किए गए ग्राम-नेगेटिव गैर-बैसिलस बैक्टीरिया जो प्रारंभिक लैक्टोज किण्वन परीक्षण में सकारात्मक थे, वास्तव में गैस का उत्पादन करने के लिए लैक्टोज को किण्वित कर सकते हैं। ऊपर बताए गए चयनात्मक ईएमबी माध्यम पर, ग्राम धुंधला होने के लिए 1 से 2 संदिग्ध कॉलीफॉर्म कॉलोनियों को चुनें, और एक ही समय में लैक्टोज किण्वन ट्यूबों को इनोक्यूलेट करें, और उन्हें 36 ± l ° C इनक्यूबेटर में 24 ± 2 घंटे के लिए गैस का निरीक्षण करने के लिए रखें। उत्पादन। . जहां लैक्टोज किण्वन ट्यूब गैस पैदा करती है और चने का दाग नकारात्मक होता है, बैसिलस मुक्त बैक्टीरिया को कोलीफॉर्म के लिए सकारात्मक बताया जाता है; जहां लैक्टोज किण्वन ट्यूब गैस का उत्पादन नहीं करती है या चने का दाग सकारात्मक है, इसे कोलीफॉर्म के लिए नकारात्मक के रूप में सूचित किया जाता है। एस्चेरिचिया कोलाई एक महत्वपूर्ण संकेतक है जो दर्शाता है कि भोजन दूषित है या नहीं। पता लगाने की विधि में महारत हासिल करना एक बुनियादी कौशल है जो प्रत्येक खाद्य निरीक्षक के पास होना चाहिए।

सेल कल्चर फ्लास्कcell culture flasks to detect E. coli group indicators. Escherichia coli is an important indicator that reflects whether food is contaminated. Mastering the detection method is a basic skill that every food inspector should possess.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.