सेल कल्चर फ्लास्क में कोशिकाओं को कैसे पारित करें

उपसंस्कृति संस्कृति को छोटे भागों में विभाजित करने, उन्हें एक अन्य संस्कृति पोत (बोतल) में पुन: टीका लगाने और फिर संवर्धन करने की प्रक्रिया को संदर्भित करती है। सेल कल्चर फ्लास्क कोशिकाओं की खेती करते समय आमतौर पर उपभोग्य सामग्रियों का उपयोग किया जाता है। तो, फ्लास्क में कोशिकाओं को उपसंस्कृति कैसे करें?

आम तौर पर, सेल कल्चर फ्लास्क में कोशिकाएं एक घने मोनोलेयर में विकसित होती हैं और मूल रूप से संतृप्त होती हैं। कोशिकाओं को पुन: उत्पन्न करने और कोशिकाओं की संख्या का विस्तार करने के लिए सक्षम करने के लिए, मार्ग संचालन करना आवश्यक है। निलंबित कोशिकाओं को सीधे अलग किया जा सकता है, जबकि अनुयाई कोशिकाओं को अलग करने से पहले उन्हें पचाने की आवश्यकता होती है। आम तौर पर, प्रोटीयोलाइटिक एंजाइम (जैसे ट्रिप्सिन) का उपयोग अनुयाई कोशिकाओं को एकल कोशिकाओं में पचाने के लिए किया जाता है। पाचन में सुधार के लिए एथिलीनडायमाइनटेट्राएसेटिक एसिड (ईडीटीए) भी मिलाया जा सकता है। कोशिकाओं को तब तक देखें जब तक कोशिकाएं गोल न हो जाएं और बोतल की दीवार से अलग न हो जाएं। इस प्रक्रिया में अक्सर 5-15 मिनट लगते हैं। सेल क्लंप से बचने के लिए, कोशिकाओं को पचाने की प्रक्रिया के दौरान सेल कल्चर फ्लास्क को टैप न करें।

विशेष रूप से मुश्किल से पचने वाली कोशिकाओं के लिए, आप ट्रिप्सिन ईडीटीए पाचन समाधान जोड़ सकते हैं और कोशिकाओं को 37 डिग्री सेल्सियस पर रख सकते हैं। पाचन की सुविधा। कोशिकाओं को बोतल की दीवार से अलग करने के बाद, पाचन को रोकने के लिए तुरंत सीरम युक्त एक पूरा माध्यम जोड़ें। सीरम में कुछ प्रोटीन अग्न्याशय को बाधित कर सकते हैं। एंजाइम गतिविधि। सामान्य तौर पर, सेंट्रीफ्यूजेशन आवश्यक नहीं है। यदि कोशिकाओं को सीरम-मुक्त या निम्न-सीरम माध्यम की आवश्यकता होती है, तो 5 मिनट के लिए 125000 ग्राम पर अपकेंद्रित्र, फिर बंद माध्यम को त्यागें, उपयुक्त नया माध्यम जोड़ें और उपसंस्कृति से पहले कोशिकाओं को धीरे से मिलाएं।

सेल पासिंग अनुपात आम तौर पर 1: 2 है -1:20, सेल प्रकार पर निर्भर करता है। पारित होने की प्रक्रिया में, ट्रिप्सिन कुछ कोशिकाओं की कोशिका झिल्ली को नुकसान पहुंचाएगा। आप कोशिकाओं को धीरे से परिमार्जन करने के लिए एक सेल खुरचनी का उपयोग कर सकते हैं, कोशिकाओं को मिलाने के लिए उचित मात्रा में माध्यम, धीरे से पिपेट जोड़ सकते हैं और उन्हें एक नई संस्कृति फ्लास्क में स्थानांतरित कर सकते हैं।

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.