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सेल कल्चर प्लेटएक प्रकार का जैविक उपकरण है। इसे आकार के अनुसार सपाट तल और गोल तल में बांटा गया है। कुओं की संख्या में 6 कुएँ, 12 कुएँ, 24 कुएँ, 48 कुएँ, 96 कुएँ, 384 कुएँ आदि शामिल हैं। यह मुख्य रूप से सेल कल्चर के लिए उपयोग किया जाता है और इसका उपयोग मापने के लिए भी किया जा सकता है। प्रोटीन सांद्रण, 96-वेल प्लेट्स का उपयोग आमतौर पर एमटीटी का पता लगाने के लिए किया जाता है। पता लगाने का सिद्धांत यह है कि जीवित कोशिकाओं के माइटोकॉन्ड्रिया में सक्सेनेट डिहाइड्रोजनेज बहिर्जात एमटीटी को पानी-अघुलनशील नीले-बैंगनी क्रिस्टल फॉर्मेज़ान (फॉर्मेज़न) में कम कर सकता है और इसे कोशिकाओं में जमा कर सकता है, जबकि मृत कोशिकाओं का ऐसा कोई कार्य नहीं होता है। डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड (डीएमएसओ) कोशिकाओं में फॉर्मेज़ान को भंग कर सकता है, और इसका प्रकाश अवशोषण मान 570nm पर एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसे के साथ मापा जाता है, जो अप्रत्यक्ष रूप से जीवित कोशिकाओं की संख्या को प्रतिबिंबित कर सकता है। सेल नंबरों की एक निश्चित सीमा के भीतर, एमटीटी क्रिस्टल गठन की मात्रा कोशिकाओं की संख्या के समानुपाती होती है। पता लगाने के चरण इस प्रकार हैं:
1. कोशिकाओं को
में कल्चर करें। सेल घनत्व उपयुक्त होने के बाद, प्रत्येक कुएं में 50ul एमटीटी डालें और 4 घंटे के लिए कल्चर करना जारी रखें;
96-वेल सेल कल्चर प्लेट एमटीटी युक्त कल्चर माध्यम को चूसें और 150ul डीएमएसओ मिलाएं। क्रिस्टल को पूरी तरह से भंग करने के लिए क्षैतिज रूप से 10 मिनट के लिए कंपन करें। निलंबित कोशिकाओं के लिए, केंद्रापसारक के बाद, 2।
माध्यम को चूसें
, और फिर घुलने के लिए डीएमएसओ जोड़ें;3। एंजाइम से जुड़े इम्युनोसे उपकरण पर 550 एनएम पर अवशोषण को मापें (एक उचित नियंत्रण समूह और रिक्त समूह सेट करें); 4। कोशिका उत्तरजीविता दर = प्रायोगिक समूह का अवशोषण मूल्य/नियंत्रण समूह का अवशोषण मूल्य * 100%।
ऑपरेशन के दौरान यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि एमटीटी कार्सिनोजेनिक है। यदि संभव हो तो पारदर्शी फिल्म दस्ताने पहनने की कोशिश करें। तैयार एमटीटी को बाँझ होने की जरूरत है। एमटीटी बैक्टीरिया के प्रति बहुत संवेदनशील है। इससे कोई फर्क नहीं पड़ता कि आप 96-वेल सेल कल्चर प्लेट को प्रकाश से बचाए बिना जोड़ते हैं। , आखिरकार, समय कम है, या आप कंसोल पर प्रकाश बंद कर सकते हैं।
4. Cell survival rate=absorbance value of experimental group/absorbance value of control group*100%.
It should be noted during the operation that MTT is carcinogenic. If possible, try to wear the kind of transparent film gloves. The prepared MTT needs to be sterile. MTT is very sensitive to bacteria. It does not matter if you add to the 96-well cell culture plate without protecting it from light. , After all, the time is short, or you can turn off the lighting on the console.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.