सेल लिसिस प्रयोग में सेल कल्चर फ्लास्क का अनुप्रयोग

सेल पारगम्यता और गतिविधि को बदलने के लिए सेल लिसिस एक महत्वपूर्ण प्रयोगात्मक विधि है। इसका मतलब है कि एक कोशिका के वायरस से संक्रमित होने के बाद, वायरस अपने स्वयं के वंश को संश्लेषित करने के लिए मेजबान कोशिका में पोषक तत्वों का उपयोग करता है, और फिर वायरस संतान मेजबान कोशिका को नष्ट कर देता है और कोशिकाओं से बाहर निकल जाता है। सेल विश्लेषण प्रयोगों में, सेल कल्चर फ्लास्क एक सामान्य उपभोज्य हैं। सेल लिसिस के चरण इस प्रकार हैं:

1। कल्चरल मीडियम को बाहर डालें, और सेल कल्चर बोतल को अब्सॉर्बेंट पेपर पर उल्टा कर दें ताकि एब्जॉर्बेंट पेपर कल्चर मीडियम को सोख ले (या बोतल को थोड़ी देर के लिए सीधा रखें ताकि अवशिष्ट कल्चर मीडियम बोतल के नीचे तक प्रवाहित हो सके) और फिर इसे चूसने के लिए एक पिपेट का उपयोग करें ).

2. कोशिकाओं की प्रत्येक बोतल में 3 मिली 4 ℃ प्री-कूल्ड पीबीएस (0.01M pH7.2～7.3) मिलाएं। कोशिकाओं को फ्लैट रखना और कोशिकाओं को धोने के लिए 1 मिनट के लिए धीरे से हिलाएं, और फिर वाशिंग समाधान को त्याग दें। उपरोक्त ऑपरेशन को दो बार दोहराएं, कोशिकाओं को तीन बार धोने के लिए संस्कृति तरल पदार्थ को धो लें। पंजाबियों को त्यागें और कल्चर फ्लास्क को बर्फ पर रखें।

3. 1ml lysis बफर में 10ul PMSF (100mM) मिलाएं, अच्छी तरह हिलाएं और बर्फ पर रखें। (पीएमएसएफ को तब तक हिलाना चाहिए जब तक कि लसीका के घोल में मिलाने से पहले कोई क्रिस्टल न हो।)

4। कोशिकाओं के प्रत्येक फ्लास्क में PMSF युक्त 400ul lysis बफर जोड़ें, और 30 मिनट के लिए बर्फ पर lyse करें। कोशिकाओं को पूरी तरह से नष्ट करने के लिए, फ्लास्क को बार-बार हिलाना चाहिए।

5. लसीका के बाद, संस्कृति फ्लास्क (कार्रवाई तेज होनी चाहिए) के एक तरफ कोशिकाओं को परिमार्जन करने के लिए एक साफ खुरचनी का उपयोग करें, और फिर सेल मलबे को स्थानांतरित करने के लिए एक बंदूक का उपयोग करें और 1.5ml अपकेंद्रित्र ट्यूब को lysate करें। (पूरा ऑपरेशन जितना हो सके बर्फ पर ही करना चाहिए।)

6। 12000 rpm पर 4 डिग्री सेल्सियस पर 5 मिनट के लिए केंद्रापसारक । (अपकेंद्रित्र को पहले से ठंडा करने के लिए चालू करें)

7. अपकेंद्रित्र सतह पर तैरनेवाला को 0.5 मिनट के लिए एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में स्थानांतरित करें और इसे -20 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें। , HEK 293 कोशिकाएँ, CAR-T कोशिकाएँ, CHO कोशिकाएँ, कीट कोशिकाएँ, आदि

Cell culture flasks कोशिका संवर्धन फ्लास्क

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.