Fleascáin shaothrúcháin cille a chur i bhfeidhm agus baictéir lysogenic á scrúdú

Wed May 18 15:00:50 CST 2022

Tagraíonn baictéir lysogenic do bhaictéir a bhfuil próiféisí comhtháite ar a gcromosóim agus is féidir leo fás agus atáirgeadh de ghnáth gan a bheith lísithe. Baineadh úsáid go forleathan as baictéarophages éadrom i réimsí an aistrithe, veicteoirí innealtóireachta géiniteacha, agus bitheolaíocht mhóilíneach. Is féidir an fleascán cultúir cille a úsáid chun lysogenicity na mbaictéar a sheiceáil. Is é seo a leanas an modh oibríochta sonrach:

1. Cultúr na mbaictéar lysogenic: E. coli 225 (λ) ionaclaithe arna ghníomhachtú ag an bhfána LB isteach i bhfleascán saothraithe cille 250ml ina bhfuil tuaslagán cultúir 20ml LB, cultúr le croitheadh ​​ag 30 ° C ar feadh 16 uair an chloig, agus ansin fionraí baictéarach 2ml a thógáil uaidh agus ceangail le ceann eile é I bhfleascán Erlenmeyer 250ml a bhfuil 20ml de bhrat LB ann, saothraítear é agus croith ag 37°C ar feadh 2 uair go dtí an chéim logartamach.

2. Fág an phage saor in aisce: Más é Bacillus an brú atá le tástáil, is féidir é a dhéanamh i bhfionraí spóir, agus ansin é a chóireáil ag 80 ° C ar feadh 10 nóiméad chun an phage a d'fhéadfadh a bheith asaithe agus saor in aisce ar dhromchla na baictéir lysogenic a mharú; más rud é go bhfuil an brú atá le tástáil neamh-Bacillus , Bain úsáid as antiserum ullmhaithe ag phage nó tuaslagán citrate sóidiam 0.2% chun cealla lysogen céim logála a nigh chun phage dromchla-asaithe agus saor in aisce a bhaint. Tar éis lártheifneoiriú ag 4000r/nóim ar feadh 10 nóiméad, is féidir an súthach a chur leis le baictéir táscaire íogaire chun pláta ciseal dúbailte a chinneadh, a úsáidtear chun saorphage an tsampla agus an phage a adsorbaíonn na baictéir lysogenic a thástáil. An phage i ndiaidh lártheifneoraithe Tá na cealla ionduchtaithe.

Application of cell culture flasks in the examination of lysogenic bacteria

3. Ionduchtú baictéir lysogenic: nitear na baictéir a bhailítear tar éis lártheifneoraithe faoi dhó le gnáth-salanda steiriúla, agus déantar iad i dtiúchan deiridh de 1011 cealla/ml le gnáth-seile nó maolán Tris-HCL 100mmol/l (pH7.0) Le haghaidh fionraí baictéarach, cuir leis. 5ml de fhionraí baictéarach chuig gach mias, ionradaigh le lampa UV 30W ar fad 30cm ar feadh 30í, cuir láithreach 5ml de thuaslagán cultúir LB comhchruinnithe dúbailte, measc go maith agus gor sa dorchadas ag 37 ° C ar feadh 2h.

4. Cigireacht ar tréithchineálacha lysogenic: Oibriú de réir an mhodha agar ciseal dúbailte, cuir cúpla braon de chlóraform leis an lysate ionduchtaithe thuas, agus caolaigh go cuí leis an modh caolaithe 10-huaire. Tar éis na trí chaolú den chaolú a roghnú, glac 0.3ml le haghaidh gach caolaithe. Measc go maith le 0.2ml de fhionraí baictéir E. coli 226 atá íogair ó thaobh na céime logartamach, ansin cuir meán leathchorp LB atá leáite agus fuaraithe go 45 ° C, measc láithreach, agus ansin é a dhoirteadh ar an meánphláta soladach LB. Tar éis soladú, 37 Gor ag ℃ ar feadh 6h agus breathnaigh. Má tá líon mór plaiceanna le feiceáil ar an pláta saothraithe, cruthaíonn sé gur lysogen.

é an brú a tástáladh Le seiceáil an bhfuil lysogenicity ag na baictéir, lean na céimeanna thuas. Tabhair aird ar steiriúlacht an phróisis le linn oibriú chun oibriú míchuí a sheachaint a dhéanann difear do thorthaí na tástála.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.