English
Is modh turgnamhach tábhachtach é lysis cille chun tréscaoilteacht agus gníomhaíocht cille a athrú. Ciallaíonn sé, tar éis do chill a bheith ionfhabhtaithe le víreas, go n-úsáideann an víreas na cothaithigh sa chill óstach chun a sliocht féin a shintéisiú, agus ansin scriosann an sliocht víreas an chill óstaigh agus scaoiltear amach as cealla é. I dturgnaimh lysis cille, tá fleascáin chultúir cille inchaite coitianta. Is iad seo a leanas na céimeanna le haghaidh lysis cille:
1. Doirt amach an meán cultúir, agus búcla an buidéal cultúir cille bun os cionn ar pháipéar ionsúiteach ionas go n-ionsúnn an páipéar ionsúiteach an meán cultúir (nó cuir an buidéal ina seasamh ar feadh tamaill chun ligean don mheán cultúir iarmharach sreabhadh go bun an bhuidéil agus ansin bain úsáid as pípéad chun é a tharraingt ).
2. Cuir 3ml de PBS réamhfhuaraithe 4 ℃ (0.01M pH7.2～7.3) le gach buidéal cealla. Leag na cealla cothrom agus croith go réidh ar feadh 1 nóiméad chun na cealla a ní, agus ansin caith amach an tuaslagán níocháin. Déan an oibríocht thuas faoi dhó, ag níochán na cealla trí huaire chun an sreabhach cultúir a ní. Caith amach an PBS agus cuir an fleascán cultúir ar oighear.
3. Cuir 10ul PMSF (100mM) le maolán lysis 1ml, croith go maith agus cuir ar oighear é. (Ní mór PMSF a chroitheadh go dtí nach bhfuil aon criostail ann sula measctar é leis an tuaslagán lysis.)
4. Cuir 400ul de mhaolán lysis ina bhfuil PMSF le gach fleascán cealla, agus cuir ar leac oighir ar feadh 30 nóiméad. Chun na cealla a lyse go hiomlán, ní mór an fleascán a chroitheadh go minic.
5. Tar éis lysis, bain úsáid as scraper glan chun na cealla a scrapeadh ar thaobh amháin den fhleascán cultúir (ba chóir go mbeadh an gníomh tapa), agus ansin bain úsáid as gunna chun an smionagar cille a aistriú agus a lysate chuig feadán lártheifneoir 1.5ml. (Ba chóir an oibríocht iomlán a dhéanamh ar oighear an oiread agus is féidir.)
6. Lártheifneoir ag 12000 rpm ag 4°C ar feadh 5 nóiméad. (Cuir an lártheifneoir ar siúl roimh ré le fuarú roimh ré)
7. Aistrigh an forshnáthán lártheifneoirithe isteach i bhfeadán lártheifneora ar feadh 0.5 nóiméad agus é a stóráil ag -20 °C.
Fleascáin chultúir Cell ní hamháin iad a úsáid le haghaidh turgnaimh lysis cille, ach freisin le haghaidh cultúr cille agus fíocháin meánscála sa tsaotharlann, mar chealla Vero , cealla HEK 293, cealla CAR-T, cealla CHO, cealla feithidí, etc.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.