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Les bactéries coliformes désignent un groupe de bactéries gram-négatives non bacilles qui peuvent fermenter le lactose, produire de l'acide et des gaz, aérobies et anaérobies facultatifs. Dans les applications pratiques, il est souvent utilisé comme indicateur de la contamination des aliments par des matières fécales. Parmi toutes les méthodes de détection, l'utilisation de flacons de culture cellulaire pour la détection est la plus couramment utilisée. Les étapes de l'opération sont les suivantes :
1. Prélèvement et dilution
(1) Selon la méthode aseptique, mettre 25 g (ou 25 mL) de l'échantillon à tester dans un flacon de culture cellulaire contenant 225 mL d'eau stérile (nombre approprié prédéfini de billes de verre dans le flacon) ou un mortier stérilisé, et secouez-le soigneusement. Ou moudre pour obtenir une dilution uniforme de 1:10. Il est préférable d'utiliser un homogénéisateur stérile pour les échantillons solides et de centrifuger à une vitesse de 8000～10000r/min pendant 1 min pour faire une dilution 1:10.
(2) Utiliser une paille stérile de 1mL pour aspirer 1Ml de dilution 1:10, le verser dans un tube à essai contenant 9mL d'eau stérile, agiter et mélanger pour faire une dilution 1:100, remplacer par une paille stérile 1mL, presser Les opérations ci-dessus sont faites successivement 10 fois les dilutions en série .
(3) Selon les exigences d'hygiène alimentaire ou l'estimation de la contamination des échantillons à tester, sélectionner trois dilutions et ensemencer 3 tubes pour chaque dilution. Il peut également être inoculé directement avec l'échantillon.
2. Test initial de fermentation du lactose
Ceci est communément appelé test hypothétique. Son but est de vérifier l'échantillon pour les bactéries qui fermentent le lactose pour produire du gaz. L'échantillon à tester est inoculé dans le tube de fermentation des sels biliaires lactose, le tube de fermentation des sels biliaires double lactose est utilisé pour l'inoculum supérieur à 1 mL ; le seul tube de fermentation des sels biliaires de lactose est utilisé pour les 1 mL et moins de 1 mL. Inoculer 3 tubes pour chaque dilution et les placer dans un incubateur à 36±1℃ pendant 24±2h. Si tous les tubes de fermentation du lactose et des sels biliaires ne produisent pas de gaz, cela peut être signalé comme négatif pour les bactéries coliformes. S'il y a une production de gaz, suivez la procédure ci-dessous.
3. Culture de séparation
Les tubes de fermentation produisant du gaz ont été striés et inoculés sur des plaques de gélose au bleu de méthylène éosine, et cultivés dans un incubateur à 36 ± 1°C pendant 18 à 24 heures. Ensuite, la morphologie de la colonie a été observée et une coloration de Gram, un examen microscopique et un test de re-fermentation ont été effectués.
4. Test de double fermentation du lactose
Le test dit de confirmation, dont le but est de prouver que les bactéries gram-négatives non bacilles isolées du tube à essai qui était positif lors du test initial de fermentation du lactose peuvent effectivement fermenter le lactose pour produire du gaz. Sur le milieu sélectif EMB mentionné ci-dessus, prélever 1 à 2 colonies suspectes de coliformes pour la coloration de Gram, et inoculer les tubes de fermentation du lactose en même temps, et les placer dans un incubateur à 36±l°C pendant 24±2 heures pour observer le gaz production. . Lorsque le tube de fermentation du lactose produit des gaz et que la coloration de Gram est négative, les bactéries exemptes de Bacillus sont signalées comme positives pour les coliformes ; lorsque le tube de fermentation du lactose ne produit pas de gaz ou que la coloration de Gram est positive, elle est signalée comme négative pour les coliformes.
Ce qui précède est le mode opératoire d'utilisation de flacons de culture cellulaire pour détecter les indicateurs du groupe E. coli. Escherichia coli est un indicateur important qui indique si les aliments sont contaminés. Maîtriser la méthode de détection est une compétence de base que tout inspecteur alimentaire devrait posséder.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.