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La sous-culture fait référence au processus de division de la culture en petites parties, de réinoculation dans un autre récipient de culture (bouteille), puis de culture. Flacons de culture cellulaire sont des consommables couramment utilisés lors de la culture de cellules. Alors, comment sous-culturer les cellules dans le flacon ?
Généralement, les cellules dans les flacons de culture cellulaire se développent en une monocouche dense et sont fondamentalement saturées. Afin de permettre aux cellules de continuer à se reproduire et d'augmenter le nombre de cellules, il est nécessaire d'effectuer des opérations de passage. Les cellules en suspension peuvent être séparées directement, tandis que les cellules adhérentes doivent être digérées avant de pouvoir être séparées. Généralement, les enzymes protéolytiques (telles que la trypsine) sont utilisées pour digérer les cellules adhérentes en cellules individuelles. De l'acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA) peut également être ajouté pour améliorer la digestion. Observez les cellules jusqu'à ce qu'elles deviennent rondes et se détachent de la paroi de la bouteille. Ce processus prend souvent 5 à 15 minutes. Afin d'éviter les amas de cellules, ne tapotez pas les flacons de culture cellulaire pendant le processus de digestion des cellules.
Pour les cellules particulièrement difficiles à digérer, vous pouvez ajouter une solution de digestion trypsine EDTA et placer les cellules à 37 °C pour faciliter la digestion. Une fois les cellules séparées de la paroi de la bouteille, ajouter immédiatement un milieu complet contenant du sérum pour arrêter la digestion. Certaines protéines du sérum peuvent inhiber le pancréas. Activité enzymatique. En général, la centrifugation n'est pas nécessaire. Si les cellules nécessitent un milieu sans sérum ou à faible teneur en sérum, centrifugez à 125 000 g pendant 5 minutes, puis jetez le milieu interrompu, ajoutez un nouveau milieu approprié et mélangez doucement les cellules avant la sous-culture.
Le rapport de passage des cellules est généralement de 1:2 -1:20, selon le type de cellule. Au cours du passage, la trypsine endommage la membrane cellulaire de certaines cellules. Vous pouvez utiliser un grattoir à cellules pour gratter doucement les cellules, ajouter une quantité appropriée de milieu, pipeter doucement pour mélanger les cellules et les transférer dans un nouveau flacon de culture.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.