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Un cell factory est une structure monocouche ou multicouche de consommables de culture cellulaire. Au cours du processus de culture cellulaire, nous devons saisir l'état de croissance des cellules à temps avant de passer à l'étape suivante. Le nombre de cellules viables peut être détecté par coloration au bleu trypan. La méthode de fonctionnement spécifique est la suivante :
1. Pour les cellules adhérentes, aspirer le milieu, ajouter la solution de digestion et digérer dans l'incubateur pendant un temps approprié. Une fois les cellules devenues rondes, la digestion a été terminée en ajoutant un volume de milieu égal ou supérieur au volume du digestat. Après centrifugation, la suspension cellulaire est réalisée avec du milieu de culture ;
2. Prenez 0,5 ml de solution de bleu trypan, 0,3 ml de PBS et 0,2 ml de suspension cellulaire et mélangez bien. Ensuite, le mélange a été laissé pendant 1-2min. Utilisez une pipette capillaire ou un petit embout de pipette de 10 ul pour prélever une petite quantité du mélange et l'injecter dans l'hémocytomètre ;
3. Comptez au moins 1000 cellules et comptez le nombre de cellules colorées ;
4. Laver la plaque de comptage et la lamelle avec de l'eau ultra pure et de l'éthanol à 75 % ;
5. Les cellules normales ne seront pas colorées, seulement après la mort des cellules, la perméabilité de la membrane cellulaire devient plus grande, le bleu trypan pénètre dans les cellules et les cellules apparaissent en bleu. Le mélange ne doit pas être placé trop longtemps, sinon les cellules vivantes normales absorberont également le colorant, ce qui affectera la précision du comptage ;
6. Viabilité cellulaire (%) = (nombre total de cellules - nombre de cellules colorées)/nombre total de cellules*100 ;
7. Comme la méthode de comptage des cellules, la coloration au bleu trypan comporte une grande erreur. Il ne peut détecter que le niveau d'apoptose précoce et ne peut pas montrer la différence entre le groupe témoin et le groupe expérimental.
Dans le processus de culture de cellules dans une usine de cellules, il y a toujours des cellules qui meurent pour diverses raisons. La maîtrise du nombre de cellules vivantes et de la viabilité cellulaire est une opération clé dans les expériences de culture cellulaire et un moyen efficace d'assurer le déroulement de l'expérience.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.