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La culture cellulaire implique l'inoculation cellulaire, la culture, la récolte et d'autres processus. Les cellules du flacons de culture cellulaire ont grossi jusqu'à un certain point et les cellules doivent être récoltées. À ce moment, les cellules sur la paroi du flacon doivent être digérées avec de la trypsine puis récoltées. Le temps de digestion doit être contrôlé lors de l'utilisation de la pancréatine.
La trypsine est une protéase hétérogène, qui peut dégrader la protéine sur la membrane cellulaire et les flacons de culture cellulaire. En dégradant la protéine à un endroit précis, la protéine à la jonction entre les protéines est dégradée et les cellules deviennent sphériques en raison de la tension de leur cytosquelette interne, séparant ainsi les cellules. Le degré de digestion de la trypsine est une étape clé de la culture cellulaire : les débris cellulaires excessivement digérés augmentent, l'écume noire augmente, les cellules tombent en morceaux, ce qui affecte sérieusement la viabilité cellulaire, et certaines cellules flottent et perdent avec la trypsine rejetée ; digestion Insuffisante, les cellules sont difficiles à expulser de la paroi du flacon, des pipetages répétés nuisent également à la viabilité cellulaire.
Différents tissus ou cellules réagissent différemment à l'action de la pancréatine. L'activité des cellules dispersées de pancréatine est également liée à sa concentration, sa température et son temps d'action. Lorsque le pH est de 8,0 et la température de 37, la capacité d'action de la solution de pancréatine est relativement forte. Lors de l'utilisation de pancréatine, la concentration, la température et le temps doivent être contrôlés pour éviter les dommages cellulaires causés par une digestion excessive. Étant donné que Ca2+, Mg2+, le sérum et les protéines peuvent réduire l'activité de la pancréatine, le BSS sans Ca2+ et Mg2+ doit être utilisé lors de la préparation d'une solution de pancréatine, telle que la solution D-Hanks. Lorsque vous terminez la digestion, utilisez un milieu de culture contenant du sérum ou un inhibiteur de trypsine pour arrêter l'effet de la pancréatine sur les cellules.
De plus, s'il s'agit d'une cellule nouvellement achetée, vous pouvez d'abord utiliser une faible concentration de trypsine pour connaître la digestion temps, et observez si les cellules sont rondes toutes les minutes et faites un enregistrement. En bref, lors de la récolte des cellules dans le flacons de culture cellulaire, le temps de digestion de la trypsine doit être contrôlé afin de maintenir la viabilité cellulaire.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.