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1. Jetez le milieu de culture d'origine dans le flacon de culture cellulaire rempli de cellules.avoir un cou droit, un torticolis, un cou d'angle, un triangle, un rectangle, etc. selon différentes formes. Les spécifications incluent 25 ml, 75 ml, 175 ml et 250 ml. Les petites tailles sont principalement utilisées pour le passage des cellules, la conservation des cellules et la fourniture de cellules pour les expériences, etc. utilisation. saturé. Afin de permettre aux cellules de continuer à croître et d'augmenter le nombre de cellules, elles doivent être sous-cultivées (re-cultivées). La sous-culture est également un moyen de préserver les espèces cellulaires. En même temps, c'est un processus nécessaire pour diverses expériences utilisant des cellules cultivées. Les cellules en suspension peuvent être séparées directement, tandis que les cellules adhérentes doivent être digérées avant de pouvoir être séparées. Les étapes spécifiques sont les suivantes :
2. Ajouter 0,5 à 1 ml de solution de pancréatine à 0,25 %, de manière à ce que les cellules au fond du flacon soient immergées dans la solution.
3. Mettez un bouchon en caoutchouc sur la bouteille et placez-la sous un microscope inversé pour observer les cellules. Au fil du temps, les cellules adhérentes d'origine ont progressivement eu tendance à être rondes, et la pancréatine a été jetée lorsque les cellules n'avaient pas encore flotté, et 10 ml de milieu de culture ont été ajoutés pour terminer la digestion. L'observation de la digestion peut également se faire à l'œil nu. Lorsque le fond de la bouteille apparaît blanc et que de fins trous d'épingle apparaissent, la digestion peut être terminée. Généralement, le temps de digestion à température ambiante est d'environ 1 à 3 minutes.
4. Utilisez une pipette pour souffler les cellules adhérentes dans une suspension, divisez-les en deux à trois bouteilles, branchez la solution de culture avec un bouchon en caoutchouc et placez-la à 37 ° C pour continuer la culture. Observez la croissance adhérente le lendemain.
Ce qui précède est l'application de
dans le passage cellulaire. La méthode de préparation de la solution de digestion est la suivante : peser 0,25 g de trypsine (activité 1:250), ajouter 100 ml de solution de Hank sans Ca2+, Mg2+ pour dissoudre, filtrer stériliser par filtration, conserver à 4 °C et remettre à température à 37 °C °C avant utilisation. L'EDTA peut également être ajouté à la solution de pancréatine pour que la concentration finale atteigne 0,02 %.
flacons de culture cellulairecell culture flasks in cell passaging. The preparation method of digestion solution is as follows: Weigh 0.25g trypsin (activity 1:250), add 100ml Ca2+, Mg2+-free Hank’s solution to dissolve, filter Sterilize by filtration, store at 4°C, and return to temperature at 37°C before use. EDTA can also be added to the pancreatin solution to make the final concentration reach 0.02%.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.