English
soluviljelylevyon eräänlainen biologinen työkalu. Se on jaettu tasapohjaiseen ja pyöreään pohjaan muodon mukaan. Kuoppien lukumäärä sisältää 6 kuoppaa, 12 kuoppaa, 24 kuoppaa, 48 kuoppaa, 96 kuoppaa, 384 kuoppaa jne. Sitä käytetään pääasiassa soluviljelyyn ja sitä voidaan käyttää myös mittaamiseen proteiinipitoisuutta, 96-kuoppaisia levyjä käytetään yleisesti MTT:n havaitsemiseen.
MTT-menetelmä, joka tunnetaan myös nimellä MTT-kolorimetrinen menetelmä, on menetelmä solujen eloonjäämisen ja kasvun havaitsemiseen. Havaitsemisperiaate on, että elävien solujen mitokondrioissa oleva sukkinaattidehydrogenaasi voi pelkistää eksogeenisen MTT:n veteen liukenemattomaksi sinivioletiksi kideformatsaaniksi (Formazan) ja tallettaa sen soluihin, kun taas kuolleilla soluilla ei ole tällaista toimintaa. Dimetyylisulfoksidi (DMSO) voi liuottaa formatsaania soluissa, ja sen valon absorptioarvo mitataan 570 nm:ssä entsyymi-immunomäärityksellä, joka voi epäsuorasti heijastaa elävien solujen määrää. Tietyllä solumäärän alueella MTT-kiteiden muodostumisen määrä on verrannollinen solujen lukumäärään. Tunnistusvaiheet ovat seuraavat:
1.
Viljetä soluja 96-kuoppainen soluviljelylevy:ssa. Kun solutiheys on sopiva, lisää 50 ui MTT:tä jokaiseen kuoppaan ja jatka viljelyä 4 tuntia;
2.
Ime pois MTT:tä sisältävä elatusaine ja lisää 150 ui DMSO:ta. Värähtele vaakasuunnassa 10 minuuttia, jotta kiteet liukenevat kokonaan. Suspendoituneiden solujen tapauksessa sentrifugoinnin jälkeen imi pois elatusaine ja lisää sitten DMSO:ta liukenemaan;
3. Mittaa absorbanssi aallonpituudella 550 nm entsyymikytketyllä immunomäärityslaitteella (aseta kohtuullinen kontrolliryhmä ja nollaryhmä);
4. Solujen eloonjäämisaste = koeryhmän absorbanssiarvo/verrokkiryhmän absorbanssiarvo*100%.
Leikkauksen aikana tulee huomioida, että MTT on karsinogeeninen. Jos mahdollista, yritä käyttää läpinäkyviä kalvokäsineitä. Valmistetun MTT:n tulee olla steriiliä. MTT on erittäin herkkä bakteereille. Sillä ei ole väliä, jos lisäät 96-kuoppaiselle soluviljelylevylle suojaamatta sitä valolta. , Loppujen lopuksi aika on lyhyt, tai voit sammuttaa konsolin valaistuksen.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.