با توسعه سریع صنایعی مانند بیوداروها، واکسن ها و آنتی بادی های مونوکلونال، اهمیت cell factories در کشت سلولی در مقیاس بزرگ به طور فزاینده ای برجسته شده است. کشت سلولی یک کار سختگیرانه است، با کنترل دقیق بر محیط رشد سلول، افزودن محیط کشت، و برداشت سلول ها.
هنگام استفاده از کارخانه سلول برای برداشت سلول، مراحل زیر باید به شدت دنبال می شود:
1. محلول کشت را پس از انکوباسیون ریخته و با بافر فسفات بدون کلسیم و منیزیم (CMF-PBS) (40-50 میلی لیتر در لایه) بشویید و در صورت لزوم شستشو را تکرار کنید.
2. هضم: محلول هضم (10-40 میلی لیتر در لایه) از قبل گرم می شود.
3. جمع آوری: با دور 1000 به مدت 5 دقیقه سانتریفیوژ کنید تا محلول هضم خارج شده و سلول ها جمع آوری شوند.
4. شستشو: انکوباتور هضم شده را با CMF-PBS یا محیط کشت بشویید.
در هنگام برداشت سلول به نکات زیر توجه کنید:
1. مطمئن شوید که CMF-PBS به طور کامل در هر سطح کشت فرو رفته است و کارخانه سلول را به آرامی به جلو و عقب تکان دهید تا مایع کشت باقی مانده تمیز شود.
2. محلول هضم به طور مساوی در هر لایه توزیع می شود. انکوباتور را به آرامی به جلو و عقب کج کنید تا مطمئن شوید که محلول هضم به طور کامل در سطح کشت غوطه ور شده است. برای کمک به جدا شدن سلول ها از سطح، به آرامی روی انکوباتور ضربه بزنید.
3. برای کارخانه سلول، از آنجایی که نمی توان وضعیت هضم سلول های لایه میانی را به وضوح مشاهده کرد، توصیه می شود در شرایط کشت یکسان به وضعیت هضم فلاسک کشت یا کارخانه سلول تک لایه مراجعه شود. همچنین می توانید از یک پلت فرم مشاهده کشت سلولی چند لایه اختصاصی برای مشاهده وضعیت رشد هر لایه از سلول ها استفاده کنید.
3. در صورت وجود تعداد زیادی سلول در محلول پاک کننده یا لایه کشت کارخانه سلول، لازم است چندین بار تمیز شود یا عملکرد هضم سلولی تنظیم شود.
4. انحراف جزئی دمای کشت ممکن است بر میزان برداشت سلولها تأثیر بگذارد، بنابراین به دمای تنظیم شده توجه کنید. سلول ها نسبت به محیط بسیار حساس هستند. انجام کار خوب در برداشت سلول، کلید موفقیت کشت سلولی است و همه پیوندها باید به شدت کنترل شوند.
کارخانه سلولیcell factory. Cells are very sensitive to the environment. Doing a good job in cell harvesting is the key to the success of cell culture, and all links need to be strictly controlled.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.