مراحل ویژه برای رشد سلول های کلیه همستر در فلاسک های کشت سلولی

Wed May 18 12:24:49 CST 2022

هنگام کشت سلول های مختلف، سلول فلاسک نوعی مواد مصرفی کشت سلولی است که بیشتر مورد استفاده قرار می گیرد. آنها بیشتر برای کشت سلول های چسبنده استفاده می شوند و مشخصات آن از 25 میلی لیتر تا 225 میلی لیتر است. محیط کشت سلولی کلیه همستر از این ماده مصرفی استفاده خواهد کرد و مراحل خاص کشت آن به شرح زیر است:

1. کار آماده سازی برای کشت سلول:

1) محیط MEM را آماده کنید. سرم جنین گاوی با کیفیت بالا، 10%؛ آنتی بادی دو برابر 1%.

2) شرایط کشت: فاز گاز: هوا، 95%; دی اکسید کربن، 5٪. دما: 37 درجه سانتیگراد، رطوبت دستگاه جوجه کشی 70%-80%.

3) محلول انجماد: 90% سرم، 10% DMSO، آماده مصرف.

2. پردازش سلولی:

1) بازیابی سلول های منجمد شده: به سرعت لوله انجماد حاوی 1 میلی لیتر سوسپانسیون سلولی را در حمام آب 37 درجه سانتی گراد تکان داده و ذوب کنید، آن را به یک لوله سانتریفیوژ حاوی 4-6 میلی لیتر محیط کامل اضافه کنید و مخلوط کنید. خوب. با سرعت 1000 دور در دقیقه به مدت 3-5 دقیقه سانتریفیوژ کنید، مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را مجدداً در محیط کامل معلق کنید. سپس سوسپانسیون سلولی به فلاسک کشت سلولی حاوی 8-6 میلی لیتر محیط کامل اضافه شد و در دمای 37 درجه سانتیگراد یک شبه کشت داده شد. رشد سلولی و تراکم سلولی روز بعد زیر میکروسکوپ مشاهده شد.

2) عبور سلولی: اگر تراکم سلولی به 80-90% برسد، می توان آن را زیر کشت کرد.

3) انجماد سلول ها: پس از دریافت توصيه مي‌شود براي آزمايش‌هاي بعدي، دسته‌اي از دانه‌هاي سلولي را در 3 پاساژ اول كشت منجمد كنيد.

مراحل فوق مراحل خاصي براي كشت سلول‌هاي كليه همستر در فلاسک‌هاي كشت سلولي است. علاوه بر این، هنگامی که سلول‌ها انجماد می‌شوند، سلول‌های هضم شده را مطابق فرآیند عبور سلولی در یک لوله سانتریفیوژ جمع‌آوری کنید و از هموسیتومتر برای شمارش آنها برای تعیین چگالی انجماد سلول‌ها استفاده کنید. تراکم توصیه شده انجماد سلول های عمومی 1×106~1×107 سلول زنده در میلی لیتر است.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.