English
مواد و روش ها
3.1. Shake Flask Cultivations
پیش کشت سلول‌های تعلیق MDCK.SUS2 در بود. سلول ها در یک محیط شیمیایی تعریف شده، بدون پروتئین و بدون اجزای حیوانی، Smif8 (Smif8 PGD 2×، مکمل با 5 میلی مولار گلوتامین، و 8) کشت شدند. پیروات میلی‌مولار)، که به‌طور خاص برای کشت سلول‌های MDCK تعلیقی توسعه یافته است [95]. (125 میلی‌لیتر فلاسکهای ارلن مایر پلی کربنات، #431143، Corning®، شهر نیویورک، نیویورک، ایالات متحده آمریکا) با حجم کاری 50 میلی‌لیتر (WV) رشد کردند. ، در انکوباتور Multitron Pro (Infors HT، Bottmingen، سوئیس) در دمای 37 درجه سانتی گراد و اتمسفر 5٪ CO2 با فرکانس لرزش 180 دور در دقیقه. سلول ها هر 3 تا 4 روز یکبار با تراکم بذر 0.5-0.8 × 106 سلول در میلی لیتر پاساژ شدند. در سلول های چسبنده MDCK (ECACC # 84121903). ویروس بذر دارای تیتر 1.1 × 109 TCID50/mL
آزمایش‌های رشد و عفونت برای اعتبارسنجی مدل با استفاده از فلاسکهای تکان دهنده 500 میلی‌لیتری (#4113-0500، Nalgene™، Thermo Scientific، Waltham، MA، ایالات متحده) با حجم کشت اولیه 200 میلی لیتر در 150 دور در دقیقه. دو کشت انجام شد، یکی عفونت ساختگی (کشت 1)، که در آن سلول ها برای حدود 200 ساعت رشد کردند، و یک عفونت (کشت 2)، که در آن سلول ها با IAV در حدود 49 ساعت پس از تلقیح آلوده شدند. برای دستیابی به عفونت همزمان جمعیت سلولی، moi = 10 استفاده شد. با توجه به غلظت نسبتاً کم سلول در زمان عفونت (2.1 × 106 سلول در میلی لیتر) و میزان بالای استفاده شده، نه جایگزینی متوسط و نه افزودن تریپسین (برای فعال سازی ویروس) ضروری نبود. در هر دو کشت، آب استریل Milli-Q قبل از نمونه برداری برای جبران تبخیر آب (1-2 میلی لیتر در روز) اضافه شد، زیرا آزمایش در انکوباتور غیر هیدراته انجام شد.
منبع:
https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
Source from: https://www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.