نحوه استفاده از فلاسک های کشت سلولی برای عملیات عبور سلولی

پاساژ سلولی به فرآیند تقسیم کشت به قطعات کوچک، بذردهی مجدد در ظرف کشت دیگری و سپس کشت اشاره دارد. سلول های کشت سلولی یک ماده مصرفی رایج در فرآیند پاساژ هستند، بنابراین مراحل خاص پاساژ سلولی چیست؟

1 فلاسک های کشت سلولی را از انکوباتور خارج کرده و با اسپری الکل الکل 75 درصد روی سطح بطری اسپری کنید و به میز فوق تمیز انتقال دهید.

2. درب را باز کنید، محیط کشت قدیمی را به آرامی آسپیره کنید، مقدار مناسب بافر PBS را اضافه کنید تا 1-2 بار با پیپت پاستور بشویید و بافر PBS را دور بریزید.

3. از یک پیپت برای اضافه کردن 1-2 میلی لیتر پانکراتین استفاده کنید و "صلیب" را تکان دهید تا پانکراتین کاملاً با سلول ها تماس پیدا کند.

4. فلاسک کشت سلولی را با تریپسین به مرحله میکروسکوپ معکوس منتقل کنید و هضم سلول را زیر میکروسکوپ مشاهده کنید. هنگامی که سلول ها گرد شدند و به مقدار زیاد می ریزند، خود را برای پایان دادن به هضم آماده کنید. سطح بطری را با الکل 75 درصد اسپری کنید و به سوپر نت تایوان منتقل کنید.

5. از یک پیپت (یا پیپت پاستور) برای اضافه کردن مقدار مساوی از محیط حاوی سرم برای پایان دادن به هضم استفاده کنید. به طور کامل پیپت کنید تا سلول ها کاملاً از بین بروند.

6. مایع مخلوط شده در بطری را به لوله سانتریفیوژ منتقل کنید و آن را متعادل کنید و حدود 5 دقیقه سانتریفیوژ کنید.

7. پس از سانتریفیوژ، سطح لوله سانتریفیوژ را با اسپری الکل اسپری کنید و به میز فوق تمیز منتقل کنید و درب آن را باز کنید و مایع رویی را در مخزن زباله بریزید.

8. حجم مناسبی از محیط حاوی سرم اضافه کنید و به آرامی با پیپت یا پیپت پاستور پیپت کنید تا سوسپانسیون سلولی بسازید.

9. سوسپانسیون سلولی را به 2 (یا بیشتر) فلاسک های کشت استریل تمیز تقسیم کنید، مقدار مناسبی از محیط کشت اضافه کنید و درب آن را ببندید.

10. فلاسک کشت ریز را روی صحنه میکروسکوپ معکوس قرار داده و وضعیت سلول را مشاهده کنید. تعداد سلول ها باید تضمین شود. تعداد خیلی کم روی رشد تاثیر می گذارد.

11. بطری را برای نشان دادن زمان عبور، نوع سلول، اپراتور و سایر اطلاعات علامت گذاری کنید. قبل از قرار دادن آن در انکوباتور، سطح بدنه بطری را دوباره با الکل اسپری کنید، میز عمل را تمیز کنید، سطح میز فوق تمیز را با الکل 75 درصد پاک کنید و مایعات زائد و زباله ها را تمیز کنید.

The در بالا فرآیند خاص استفاده از فلاسک های کشت سلولی برای عبور سلول است. توجه داشته باشید که در حین کار باید از لباس استریل، دستکش و ماسک استریل استفاده کنید و برای جلوگیری از آلودگی سلولی به عملیات آسپتیک در طول فرآیند توجه کنید.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.