نحوه انتقال سلول های منجمد شده به فلاسک های کشت سلولی

انجماد سلولی تکنیکی است که سلول ها را در محیطی با دمای پایین قرار می دهد تا متابولیسم سلولی را برای ذخیره سازی طولانی مدت کاهش دهد. علاوه بر محافظت از سلول ها، این فناوری اغلب برای خرید، هدیه، مبادله و انتقال سلول های خاص استفاده می شود. بنابراین، چگونه سلول‌های منجمد شده را به سلول‌های کشت سلولی?

انتقال دهیم، سلول‌های منجمد قبل از انجام عملیات بعدی باید احیا شوند. احیای سلول ها باید سریع باشد تا بقای سلول ها به خوبی حفظ شود. عملیات را می توان به صورت زیر انجام داد:

1. پس از دریافت سلول ها، بررسی کنید که آیا بسته بندی بیرونی کامل است یا خیر. بسته بندی بیرونی را باز کرده و سلول های ذخیره شده در یخ خشک را خارج کنید؛

2. بررسی کنید که آیا لوله انجماد آسیب دیده است یا خیر، آیا محتویات آن ذوب شده است یا خیر، و به سرعت لوله انجماد برداشته شده را در یک حمام آب 37 درجه سانتیگراد قرار دهید تا ذوب شود؛

3. لوله انجماد با الکل 75 درصد ضد عفونی شده و در یک کابینت ایمنی بیولوژیکی قرار می گیرد؛

4. 5 میلی لیتر محیط کامل را به یک لوله سانتریفیوژ 15 میلی لیتری برای استفاده اضافه کنید؛

5 سوسپانسیون سلولی در لوله انجماد را به محیط آماده شده اضافه کنید و به آرامی مخلوط کنید؛

6. لوله سانتریفیوژ 15 میلی لیتری را داخل سانتریفیوژ قرار داده و با سرعت 1000 دور در دقیقه (حدود 200 گرم) به مدت 3-5 دقیقه؛

7 سانتریفیوژ کنید. برای استفاده، 5 میلی لیتر محیط کامل را به فلاسک کشت سلولی 25 میلی لیتری اضافه کنید؛

8. سلول های سانتریفیوژ شده را خارج کنید، آنها را با الکل استریل کنید و در یک کابینت امن قرار دهید؛

9. مایع رویی سلول سانتریفیوژ شده را به آرامی آسپیره کنید، 1 میلی لیتر محیط کامل اضافه کنید تا سلول ها مجدداً معلق شوند؛

10. سلول های معلق مجدد را به فلاسک کشت سلولی آماده شده اضافه کنید و به آرامی مخلوط کنید؛

11. وضعیت و تراکم سلول های تلقیح شده را زیر میکروسکوپ مشاهده کنید و فلاسک کشت را برای کشت در انکوباتور 37 درجه سانتی گراد قرار دهید. از آسیب رسیدن به سلول ها به دلیل ذوب آهسته که باعث نفوذ آب به داخل سلول ها برای ایجاد تبلور مجدد درون سلولی می شود، جلوگیری کنید. فلاسک های کشت سلولی

و سایر مواد مصرفی مورد استفاده باید آسپتیک باشندcell culture flasks and other consumables used should be aseptic.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.