نحوه عبور سلول ها در فلاسک های کشت سلولی

خرده فرهنگ به فرآیند تقسیم فرهنگ به قطعات کوچک، تلقیح مجدد آنها در ظرف کشت دیگری (بطری) و سپس کشت اطلاق می شود. فلاسک های کشت سلولی معمولاً در هنگام پرورش سلول ها از مواد مصرفی استفاده می شود. بنابراین، چگونه می توان سلول ها را در فلاسک زیر کشت داد؟

به طور کلی، سلول های موجود در فلاسک های کشت سلولی به یک تک لایه متراکم تبدیل می شوند و اساساً اشباع می شوند. برای اینکه سلول ها بتوانند به تولید مثل ادامه دهند و تعداد سلول ها را گسترش دهند، لازم است عملیات عبور انجام شود. سلول های معلق را می توان به طور مستقیم جدا کرد، در حالی که سلول های چسبنده قبل از جدا شدن باید هضم شوند. به طور کلی، آنزیم های پروتئولیتیک (مانند تریپسین) برای هضم سلول های چسبنده به سلول های منفرد استفاده می شود. اتیلن دی آمین تترا استیک اسید (EDTA) نیز می تواند برای بهبود هضم اضافه شود. تا زمانی که سلول ها گرد شده و از دیواره بطری جدا شوند، سلول ها را مشاهده کنید. این فرآیند اغلب 5-15 دقیقه طول می کشد. به منظور جلوگیری از تشکیل توده های سلولی، در طول فرآیند هضم سلول ها به فلاسک های کشت سلولی ضربه نزنید.

برای سلول هایی که هضم آنها مشکل است، می توانید محلول هضم تریپسین EDTA را اضافه کنید و سلول ها را در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار دهید. تسهیل هضم پس از جدا شدن سلول ها از دیواره بطری، بلافاصله یک محیط کامل حاوی سرم اضافه کنید تا هضم متوقف شود. پروتئین های خاصی در سرم می توانند پانکراس را مهار کنند. فعالیت آنزیمی به طور کلی، سانتریفیوژ ضروری نیست. اگر سلول ها به محیط بدون سرم یا با سرم کم نیاز دارند، به مدت 5 دقیقه در 125000 گرم سانتریفیوژ کنید، سپس محیط قطع شده را دور بیندازید، محیط جدید مناسب را اضافه کنید و قبل از کشت به آرامی سلول ها را مخلوط کنید.

نسبت عبور سلولی به طور کلی 1:2 است. -1:20، بسته به نوع سلول. در فرآیند عبور، تریپسین به غشای سلولی برخی از سلول ها آسیب می رساند. می توانید از یک اسکراپر سلولی برای خراش دادن آرام سلول ها استفاده کنید، مقدار مناسبی از محیط را اضافه کنید، به آرامی سلول ها را با پیپت مخلوط کنید و آنها را به یک فلاسک کشت جدید منتقل کنید.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.