English
یک ساختار یک لایه یا چند لایه از مواد مصرفی کشت سلولی است. در طول فرآیند کشت سلولی، قبل از اینکه به مرحله بعدی برویم، باید وضعیت رشد سلول ها را به موقع درک کنیم. تعداد سلول های زنده را می توان با رنگ آمیزی تریپان بلو تشخیص داد. روش عملیات خاص به شرح زیر است:1. برای سلول های چسبنده، محیط را آسپیره کنید، محلول هضم را اضافه کنید و برای مدت مناسب در انکوباتور هضم کنید. پس از گرد شدن سلول ها، هضم با افزودن حجمی مساوی یا بیشتر از حجم ماده هضمی از محیط خاتمه یافت. پس از سانتریفیوژ، سوسپانسیون سلولی با محیط کشت cell factory
2 ساخته می شود. 0.5 میلی لیتر محلول تریپان بلو، 0.3 میلی لیتر PBS و 0.2 میلی لیتر سوسپانسیون سلولی را بردارید و خوب مخلوط کنید. سپس مخلوط به مدت 1-2 دقیقه باقی می ماند. از یک پیپت مویرگی یا یک نوک پیپت کوچک 10 ul استفاده کنید تا مقدار کمی از مخلوط را بکشید و آن را به هموسیتومتر تزریق کنید؛
3. حداقل 1000 سلول را بشمارید و تعداد سلول های رنگ شده را بشمارید؛
4. بشقاب شمارش و روکش را با آب فوق خالص و اتانول 75% بشویید.
5. سلول های طبیعی رنگ آمیزی نمی شوند، تنها پس از مرگ سلول ها، نفوذپذیری غشای سلولی بزرگتر می شود، آبی تریپان وارد سلول ها می شود و سلول ها آبی به نظر می رسند. این مخلوط نباید برای مدت طولانی قرار گیرد، در غیر این صورت سلول های زنده عادی نیز رنگ را می گیرند که بر دقت شمارش تأثیر می گذارد؛
6. زنده ماندن سلول (%) = (تعداد کل سلول - تعداد سلول های رنگ آمیزی شده) / تعداد کل سلول*100;
7. همانند روش شمارش سلولی، رنگ آمیزی آبی تریپان دارای خطای زیادی است. فقط می تواند سطح آپوپتوز اولیه را تشخیص دهد و نمی تواند تفاوت بین گروه کنترل و گروه آزمایش را نشان دهد.
در فرآیند کشت سلول ها در کارخانه سلول، همیشه سلول هایی وجود دارند که به دلایل مختلف می میرند. تسلط بر تعداد سلول های زنده و قابلیت زنده ماندن سلولی یک عملیات کلیدی در آزمایش های کشت سلولی و راهی موثر برای اطمینان از پیشرفت آزمایش است.
In the process of culturing cells in a cell factory, there are always some cells that die due to various reasons. Mastering the number of living cells and cell viability is a key operation in cell culture experiments and an effective way to ensure the progress of the experiment.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.