تولید ویروس هپاتیت C با تیتر بالا در بیوراکتور یکبار مصرف با چگالی سلولی بالا

2. مواد و روشها

2.1. نگهداری از Huh7.5 Cell

Huh7.5 کشت سلولی در دو توالی تایید شده از ژنوتیپ 5a نوترکیب SA13/JFH1core-NS5B [28]، رشد یافته در کشت سلولی تک لایه Huh7.5 در فلاسک های T، در این مطالعه استفاده شد. یک انبار ویروس پاساژ سوم با تیتر عفونت 5.8 log10 FFU/mL، که تحت شرایط حاوی سرم (SC) رشد کرده بود، برای تلقیح کشت‌های CelCradle™، تکان دادن فرهنگ‌های فلاسک و آزمایش‌های شناسایی ویروس استفاده شد. ذخیره ویروس پاساژ چهارم با تیتر عفونی 5.1 log10 FFU/mL [32]، رشد یافته در شرایط SF [39]، برای آزمایش های خصوصیات ویروس استفاده شد. در محیط حاوی سرم (SCM) نگهداری شد: محیط Eagle Modified Dulbecco (DMEM) (Gibco، Paisley، UK) حاوی 4 میلی مولار گلوتامکس و مکمل با 10% سرم جنین گاوی (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا)، 100 واحد در میلی لیتر پنی سیلین و 100 میکروگرم در میلی لیتر استرپتومایسین (سیگما). در فلاسک‌های T175 (Nunc، Roskilde، دانمارک) و فلاسک‌های کشت سه‌لایه (Nunc)، سلول‌های Huh7.5 هر 2 تا 3 روز پاساژ شدند. تمام کشت های سلولی در دمای 37 درجه سانتی گراد و 5% CO2 نگهداری شدند. ویروس HCV Stocks

منبع:

https://www.mdpi .com/2076-393X/10/2/249/htm

Source from: https://www.mdpi.com/2076-393X/10/2/249/htm 

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.