چهار روش تشخیص آلودگی مایکوپلاسما در کارخانه های سلولی

آلودگی مایکوپلاسما یک مشکل بسیار رایج هنگام کشت سلول ها در cell factories است. برخلاف سایر آلودگی‌ها، سلول‌های آلوده به مایکوپلاسما معمولاً کدر نمی‌شوند، بنابراین قضاوت با چشم غیرمسلح دشوار است. چهار راه برای تعیین اینکه آیا سلول ها به مایکوپلاسما آلوده هستند وجود دارد:

1. رنگ‌آمیزی فلورسانس DNA

روش رنگ‌آمیزی فلورسانس DNA بر این اصل استوار است که رنگ فلورسنت Hoechst33258 می‌تواند به ناحیه غنی از پایه AT در DNA مایکوپلاسما متصل شود. نقاط فلورسنت DNA مایکوپلاسما غنی از نواحی پایه AT هستند.

2. فناوری PCR

پرایمرهای خاص با توجه به توالی های حفظ شده در ژنوم مایکوپلاسما طراحی می شوند، اسید نوکلئیک نمونه مورد آزمایش تقویت می شود و تشخیص با تجزیه و تحلیل اندازه محصول تقویت شده انجام می شود. فناوری تشخیص PCR برای تشخیص آلودگی به مایکوپلاسما، با سیکل کوتاه، حساسیت بالا، ویژگی خوب، عملیات ساده استفاده می شود و می تواند تعداد زیادی نمونه را در یک زمان تشخیص دهد.

3. سنجش ایمونوسوربنت پیوندی با آنزیم (ELISA)

ELISA در تشخیص آلودگی مایکوپلاسما، با ویژگی و حساسیت خوب استفاده می‌شود و می‌تواند تشخیص تعداد زیادی نمونه را در یک زمان کامل کند. دارای ویژگی های تشخیص کیفی ساده، سریع و کمی است.

4. میکروسکوپ الکترونی

به طور کلی سلول ها در کارخانه های سلولی به مدت 48 تا 72 ساعت کشت داده می شوند. قبل از اینکه سلول‌ها تقریباً به هم متصل شوند، سلول‌ها با تریپسین هضم می‌شوند تا یک سوسپانسیون سلولی بسازند، قبل از مشاهده ثابت، جاسازی شده و برش داده می‌شوند. در حال حاضر، بیش از 20 نوع مایکوپلاسما وجود دارد که سلول ها را آلوده می کند، که بیش از 95 درصد آنها مایکوپلاسمای دهانی هستند، بنابراین اپراتورها باید هنگام کشت سلول ها به عملیات آسپتیک توجه کنند.

The above are four commonly used detection methods when detecting mycoplasma contamination in cell factories. At present, there are more than 20 kinds of mycoplasma known to contaminate cells, of which more than 95% are oral mycoplasma, so operators should pay attention to aseptic operation when culturing cells.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.