کاربرد صفحه کشت سلولی در تشخیص MTT

Wed May 18 12:21:08 CST 2022

The cell plant plateنوعی ابزار بیولوژیکی است. بر اساس شکل به ته صاف و ته گرد تقسیم می شود. تعداد چاه شامل 6 چاه، 12 چاه، 24 چاه، 48 ​​ چاهک، 96 چاه، 384 چاه و غیره است. غلظت پروتئین، صفحات 96 چاهی معمولاً برای تشخیص MTT استفاده می شود. روش

MTT که با نام روش رنگ سنجی MTT نیز شناخته می شود، روشی برای تشخیص بقا و رشد سلولی است. اصل تشخیص این است که سوکسینات دهیدروژناز در میتوکندری سلول های زنده می تواند MTT اگزوژن را به کریستال بنفش آبی-فورمازان نامحلول در آب کاهش دهد و آن را در سلول ها رسوب دهد، در حالی که سلول های مرده چنین عملکردی ندارند. دی متیل سولفوکسید (DMSO) می تواند فورمازان را در سلول ها حل کند و مقدار جذب نور آن در طول موج 570 نانومتر با روش ایمونواسی مرتبط با آنزیم اندازه گیری می شود که می تواند به طور غیرمستقیم تعداد سلول های زنده را منعکس کند. در محدوده معینی از تعداد سلول ها، میزان تشکیل کریستال MTT با تعداد سلول ها متناسب است. مراحل تشخیص به شرح زیر است:

1. سلول ها را در یک محیط کشت حاوی MTT را مکیده و 150 لیتر DMSO اضافه کنید. به مدت 10 دقیقه به صورت افقی ویبره کنید تا کریستال ها کاملا حل شوند. برای سلول‌های معلق، پس از سانتریفیوژ کردن، پرورش دهید. پس از اینکه تراکم سلولی مناسب شد، 50 ul MTT به هر چاهک اضافه کنید و به مدت 4 ساعت به کشت ادامه دهید.

مدید مدیوم، و سپس DMSO را اضافه کنید تا حل شود;3. جذب را در 550 نانومتر بر روی ابزار ایمونواسی مرتبط با آنزیم اندازه گیری کنید (گروه کنترل معقول و گروه خالی تنظیم کنید)؛ 4. میزان بقای سلولی=مقدار جذب گروه آزمایش/مقدار جذب گروه کنترل*100%

در حین عمل باید توجه داشت که MTT سرطان زا است. در صورت امکان، سعی کنید از دستکش های شفاف فیلم استفاده کنید. MTT آماده شده باید استریل باشد. MTT به باکتری بسیار حساس است. مهم نیست که صفحه کشت سلولی 96 چاهی را بدون محافظت از نور اضافه کنید. ، بالاخره زمان کوتاه است یا می توانید نور کنسول را خاموش کنید.

4. Cell survival rate=absorbance value of experimental group/absorbance value of control group*100%.

It should be noted during the operation that MTT is carcinogenic. If possible, try to wear the kind of transparent film gloves. The prepared MTT needs to be sterile. MTT is very sensitive to bacteria. It does not matter if you add to the 96-well cell culture plate without protecting it from light. , After all, the time is short, or you can turn off the lighting on the console.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.