شناسایی فعالیت سلول ها در کارخانه های سلولی - روش MTT

یک ماده مصرفی است که اغلب برای کشت سلولی چسبنده استفاده می شود. در طول آزمایش، باید وضعیت رشد سلول ها را در زمان واقعی درک کنیم و با توجه به موقعیت خاص تنظیمات مربوطه را انجام دهیم. زنده ماندن سلول ها با روش MTT برای تعیین رشد سلول قابل تشخیص است. روش MTT که به روش رنگ سنجی MTT نیز معروف است، روشی برای تشخیص بقا و رشد سلولی است. اصل تشخیص این است که سوکسینات دهیدروژناز در میتوکندری سلول های زنده می تواند MTT اگزوژن را به فرمازان کریستالی آبی-بنفش نامحلول در آب کاهش دهد و در سلول ها رسوب کند، در حالی که سلول های مرده چنین عملکردی ندارند. دی متیل سولفوکسید (DMSO) می تواند فورمازان را در سلول ها حل کند و مقدار جذب نور آن را می توان با سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم در طول موج 570 نانومتر اندازه گیری کرد که می تواند به طور غیر مستقیم تعداد سلول های زنده را منعکس کند. در محدوده تعداد سلول معین، میزان تشکیل کریستال MTT با تعداد سلول متناسب است. این روش به طور گسترده در تشخیص فعالیت برخی از عوامل بیولوژیکی فعال، غربالگری داروهای ضد تومور در مقیاس بزرگ، تست سمیت سلولی و سنجش حساسیت پرتوی تومور استفاده شده است. با حساسیت و صرفه جویی بالا مشخص می شود.cell factory

قبل از آزمایش زنده ماندن سلول ها در کارخانه سلول، یک مرحله بسیار مهم فرمولاسیون MTT است. به طور معمول غلظت MTT در این روش 5 میلی گرم بر میلی لیتر است. بنابراین، 0.5 گرم MTT را می توان وزن کرد، در 100 میلی لیتر نمک بافر فسفات (PBS) یا محیط فاقد فنل قرمز حل کرد، با فیلتر 0.22 میکرومتر فیلتر کرد تا باکتری های موجود در محلول حذف شود و در دمای 4 درجه سانتیگراد در تاریکی نگهداری شود. . . در هنگام آماده سازی و نگهداری سعی کنید ظرف را با فویل آلومینیومی بپیچید.

در هنگام استفاده از روش MTT برای اندازه گیری فعالیت سلولی در کارخانه سلول باید توجه داشت که MTT سرطان زا است پس در استفاده از آن دقت کنید. این روش فقط برای تشخیص تعداد سلول نسبی و زنده ماندن نسبی قابل استفاده است، اما نه تعداد سلول مطلق. هنگام آزمایش نتایج با میکروپلیت خوان، به منظور اطمینان از خطی بودن نتایج تجربی، جذب MTT باید تا حد امکان در محدوده 0-0.7 باشد.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.