English
Rakukultuuri plaaton omamoodi bioloogiline tööriist. Kuju järgi jaguneb see lamedapõhjaliseks ja ümarapõhjaliseks. Süvendite arv sisaldab 6 süvendit, 12 süvendit, 24 süvendit, 48 süvendit, 96 süvendit, 384 süvendit jne. Seda kasutatakse peamiselt rakukultuuris ja seda saab kasutada ka mõõtmiseks. valgu kontsentratsioon, MTT tuvastamiseks kasutatakse tavaliselt 96 süvendiga plaate.
MTT meetod, tuntud ka kui MTT kolorimeetriline meetod on meetod rakkude ellujäämise ja kasvu tuvastamiseks. Avastamise põhimõte seisneb selles, et elusrakkude mitokondrites olev suktsinaatdehüdrogenaas suudab redutseerida eksogeense MTT vees lahustumatuks sinakaslillaks kristalseks formazaniks (Formazan) ja ladestada selle rakkudesse, samas kui surnud rakkudel seda funktsiooni ei ole. Dimetüülsulfoksiid (DMSO) võib lahustada rakkudes formatsaani ja selle valguse neeldumise väärtust mõõdetakse 570 nm juures ensüümiga seotud immuunanalüüsiga, mis võib kaudselt kajastada elusrakkude arvu. Teatud rakkude arvu vahemikus on MTT kristallide moodustumise hulk võrdeline rakkude arvuga. Tuvastamise etapid on järgmised:
1.
Kultuurige lahtreid 96-süvendiline rakukultuuri plaat-s. Kui rakutihedus on sobiv, lisage igasse süvendisse 50 ul MTT-d ja jätkake kultiveerimist 4 tundi;
2.
Imeda ära MTT-d sisaldav sööde ja lisada 150 ul DMSO-d. Vibreerige horisontaalselt 10 minutit, et kristallid täielikult lahustuksid. Suspendeeritud rakkude puhul imege sööde pärast tsentrifuugimist ära ja seejärel lisage lahustamiseks DMSO;3. Mõõtke neeldumine 550 nm juures ensüümiga seotud immuunanalüüsi seadmega (määrake mõistlik kontrollrühm ja tühirühm); 4. Rakkude ellujäämismäär=katserühma neeldumisväärtus/kontrollrühma neeldumisväärtus*100%.
Operatsiooni käigus tuleb märkida, et MTT on kantserogeenne. Võimalusel proovige kanda läbipaistvaid kilekindaid. Valmistatud MTT peab olema steriilne. MTT on bakterite suhtes väga tundlik. Pole tähtis, kas lisate 96-süvendilisele rakukultuuriplaadile seda valguse eest kaitsmata. , Lõppude lõpuks on aega vähe või saate konsooli valgustuse välja lülitada.
4. Cell survival rate=absorbance value of experimental group/absorbance value of control group*100%.
It should be noted during the operation that MTT is carcinogenic. If possible, try to wear the kind of transparent film gloves. The prepared MTT needs to be sterile. MTT is very sensitive to bacteria. It does not matter if you add to the 96-well cell culture plate without protecting it from light. , After all, the time is short, or you can turn off the lighting on the console.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.