English
El paso celular se refiere al proceso de dividir el cultivo en partes pequeñas, volver a sembrar en otro recipiente de cultivo y luego cultivar. Frascos de cultivo celular son un consumible común en el proceso de pases, entonces, ¿cuáles son los pasos específicos del pase de células?
1. Saque los frascos de cultivo celular de la incubadora, rocíe alcohol al 75 % en la superficie de la botella con una lata de alcohol en aerosol y transfiérala a la mesa ultralimpia.
2. Abra la tapa, aspire suavemente el medio de cultivo antiguo, agregue una cantidad adecuada de tampón PBS para lavar 1 o 2 veces con una pipeta Pasteur y deseche el tampón PBS.
3. Use una pipeta para agregar 1-2 ml de pancreatina y agite la "cruz" para que la pancreatina entre en contacto con las células.
4. Transfiera el matraz de cultivo celular con tripsina a la platina del microscopio invertido y observe la digestión celular bajo el microscopio. Cuando las células se vuelvan redondas y se caigan en grandes cantidades, prepárese para terminar la digestión. Rocíe la superficie de la botella con alcohol al 75 % y transfiérala a Super Net Taiwan.
5. Use una pipeta (o pipeta Pasteur) para agregar una cantidad igual de medio que contenga suero para terminar la digestión. Pipetear bien para permitir que las células se desprendan por completo.
6. Transfiera el líquido mezclado en la botella a un tubo de centrífuga, equilíbrelo y centrifugue durante unos 5 minutos.
7. Después de la centrifugación, rocíe la superficie del tubo de centrífuga con una lata de alcohol en aerosol, transfiérala a la mesa de ultra limpieza, abra la tapa y vierta el sobrenadante en el tanque de residuos.
8. Agregue un volumen apropiado de medio que contenga suero y pipetee suavemente con una pipeta o una pipeta Pasteur para hacer una suspensión celular.
9. Divida la suspensión celular en 2 (o más) frascos de cultivo limpios y estériles, agregue la cantidad apropiada de medio de cultivo y cierre la tapa.
10. Coloque el matraz de cultivo en alícuotas en la platina del microscopio invertido y observe el estado de las células. El número de celdas debe estar garantizado. Un número demasiado pequeño afectará el crecimiento.
11. Marque la botella para indicar el tiempo de paso, el tipo de celda, el operador y otra información. Antes de ponerlo en la incubadora, rocíe la superficie del cuerpo de la botella con alcohol nuevamente, limpie la mesa de operaciones, limpie la superficie de la mesa ultralimpia con alcohol al 75 % y limpie los desechos líquidos y la basura.
The arriba está el proceso específico de usar frascos de cultivo celular para pasar células. Tenga en cuenta que debe usar ropa estéril, guantes estériles y máscaras durante la operación, y prestar atención a las operaciones asépticas durante todo el proceso para evitar la contaminación celular.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.