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El subcultivo se refiere al proceso de dividir el cultivo en partes pequeñas, volver a inocularlas en otro recipiente de cultivo (botella) y luego cultivar. Frascos de cultivo celular son consumibles de uso común cuando se cultivan células. Entonces, ¿cómo subcultivar las células en el matraz?
Generalmente, las células en los matraces de cultivo celular crecen hasta convertirse en una monocapa densa y básicamente están saturadas. Para permitir que las células continúen reproduciéndose y ampliar el número de células, es necesario realizar operaciones de paso. Las células suspendidas se pueden separar directamente, mientras que las células adherentes deben digerirse antes de poder separarlas. Generalmente, las enzimas proteolíticas (como la tripsina) se utilizan para digerir las células adherentes en células individuales. También se puede agregar ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) para mejorar la digestión. Observe las celdas hasta que se vuelvan redondas y se desprendan de la pared de la botella. Este proceso suele tardar entre 5 y 15 minutos. Para evitar grumos de células, no golpee los matraces de cultivo celular durante el proceso de digestión de las células.
Para células particularmente difíciles de digerir, puede agregar solución de digestión con tripsina EDTA y colocar las células a 37°C para facilitar la digestión. Después de separar las células de la pared de la botella, agregue inmediatamente un medio completo que contenga suero para detener la digestión. Ciertas proteínas en el suero pueden inhibir el páncreas. Actividad enzimática. En general, la centrifugación no es necesaria. Si las células requieren un medio sin suero o con bajo contenido de suero, centrifugue a 125 000 g durante 5 minutos, luego deseche el medio descontinuado, agregue un nuevo medio apropiado y mezcle suavemente las células antes del subcultivo.
La proporción de pases celulares es generalmente 1:2 -1:20, según el tipo de célula. En el proceso de pasaje, la tripsina dañará la membrana celular de algunas células. Puede usar un raspador de células para raspar suavemente las células, agregar una cantidad adecuada de medio, pipetear suavemente para mezclar las células y transferirlas a un nuevo matraz de cultivo.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.